[发明专利]一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法

权利要求书

1.一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法，其特征在于：高效定点转基因方法的具体操作过程按照下面步骤进行；

第一步、根据需整合到受体细胞基因组上的位置而设计出具有特异性的序列TALEN靶点；

第二步、根据设计出的TALEN靶点构建出TALEN质粒，同时，构建外源基因质粒；

第三步、将TALEN质粒和外源基因共同转染受体细胞，TALEN质粒表达的蛋白会在受体细胞基因组TALEN靶点的位置上切开一个口；外源基因会在切口处整合进入受体基因组；

第四步、对转染后的受体细胞进行稀释培养，获得细胞克隆，鉴定外源基因在受体细胞基因组上整合的细胞克隆，挑选出符合整合位置要求的阳性细胞克隆，以备后续试验使用。

2.根据权利要求1所述的一种利用TALEN技术的高效定点转基因方法，其特征在于：所述的转染后稀释培养得到的细胞克隆采用核酸原位杂交、测序或PCR技术进行鉴定外源基因在受体细胞基因组上整合的细胞克隆。