[发明专利]木薯渣用于地霉菌纤维素酶的生产及其糖化方法有效
| 申请号: | 201310203392.7 | 申请日: | 2013-05-28 |
| 公开(公告)号: | CN103266095A | 公开(公告)日: | 2013-08-28 |
| 发明(设计)人: | 何玉财;龚磊;李创;张跃;庞震;高凤婷;王利群;马江涛 | 申请(专利权)人: | 常州大学 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12P19/14;C12R1/645 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
| 地址: | 213164 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 木薯 用于 霉菌 纤维素酶 生产 及其 糖化 方法 | ||
1.木薯渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于按照如下步骤进行:
(1)菌株的培养:
摇瓶培养:将地霉 Galactomyces sp.采用本领域常规的方法,在摇瓶培养基中进行扩增培养5-8 d,培养温度为25~35 °C;
(2)纤维素酶冻干粉制备:
将上述培养获得的发酵液经过8000×g的条件下离心8 min除去菌体,硫酸铵沉淀之后获得活性粗蛋白,饱和度以质量浓度计20%-50%,活性蛋白进一步冷冻干燥获得纤维素酶冻干粉;
(3)冻干纤维素酶粉酶解预处理木薯渣:
1 g干燥的木薯渣利用20 g离子液体氯化-1-丁基-3-甲基咪唑在130 °C下进行溶解预处理30 min;
处理之后的木薯渣用去离子水洗涤再生;
再生的木薯渣纤维素原料去离子水洗涤三次后,加入pH=4.8乙酸-乙酸钠缓冲液形成混合体系,木薯渣最终质量浓度为10%,然后用终质量浓度为0.3%-0.8% 的步骤(2)中的纤维素酶进行木薯渣的酶解,在50 °C和160 rpm的恒温摇床上振荡反应,即可达到酶解木薯渣的目的。
2.根据权利要求1所述的木薯渣为碳源生产地霉菌纤维素酶及其糖化的方法,其特征在于其中步骤(1)中所述的培养基组分和含量如下:(NH4)2SO4 4-10 g/L,KH2PO4 2-6 g/L,MgSO4·7H2O 0.1-0.8 g/L,CaCl2·2H2O 0.1-0.6 g/L,Tween-80 0.5-5.0 g/L,木薯渣 10-20 g/L。
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