[发明专利]格拉替雷的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于多肽药物制备方法技术领域，特别涉及格拉替雷的制备方法。

背景技术

格拉替雷具有以下的结构：

                 (Glu,Ala,Lys,Tyr)x·xCH₃COOH

格拉替雷（Glatiramer）是一种合成的肽类化合物，是由以色列药厂TEVA所研发制造的，商品名，于1996年获美国FDA核准用於治疗多发性硬化症，药品为白色至灰白色的灭菌冻晶粉末，包装另附注射用水以调制成注射溶液之用。

在具有较多多发性硬化症患者的西方国家中,的疗效与耐受性皆获得十足的肯定。除了许多研究与临床经验证实其能大幅度地减低患者的复发率，改善失能的病况，减少脑部损伤之外，Copaxone的副作用发生率少,有助於提升患者的耐受性。另外，相关研究亦显示较之干扰素更能显著地降低复发率，防止神经进一步的损伤与恶化，而且也具有更好的耐受性。在其它长期使用的疗效研究里(6年至最长12年不等)，亦证实能持续地延缓患者其神经学上病程的恶化或者让患者维持稳定的病况，减少脑内损伤并防止神经元大量遭受破坏终至丧失功能的恶化情形。

主要藉由调控多发性硬化症患者体内的免疫进程以达到治疗的目的。进入体内后，与免疫系统内的调控因子结合并进入中枢神经，透过一连串的免疫作用扭转多发性硬化症患者其自体免疫进程；亦即刺激「有害」或前发炎性的T细胞转换为「有益的」或抗发炎的T细胞。可直接作用於神经细胞损伤部位并直接减少发炎情形。这些效益都有助於减少多发性硬化症患者其复发率，以及有效降低其进一步的损伤。

临床已有许多研究证实可有效降低复发型多发性硬化症患者其复发频率。这些研究包括密切地监控患者投药后的复发情形，相伴症状改善的评估，以及MRI(核磁共振造影)所显示的损伤部位改善情形。另外亦有研究针对Copaxone对於维护患者生理功能的影响作评估，结果显示可减少活动性损伤发展为永久的神经性损害，恢复轴突功能以及神经元的完整性，亦即防止患者中枢神经内进一步的损害与病况的恶化。

醋酸格拉替雷（）由4种氨基酸组成：L-glutamic acid(L-谷氨酸)，L-alanine（L-丙氨酸），L-lysine（L-赖氨酸）与L-tyrosine（L-络氨酸），各种氨基酸的比例见表1，平均分子量约为4000～7000daltons。

国内外关于格拉替雷制备报道的报道很多，如美国专利3849550、5800808和美国专利公开案第2006/0172942号、第2006/0154862号、第2007/0141663号等。这些专利所涉及到的制备方法是基于酪氨酸N-羧基酸酐、L-丙氨酸N-羧基酸酐、保护的L-谷氨Γ-苄脂N-羧基酸酐与保护L-赖氨酸N-羧基酸酐共聚合制备保护的共聚物。其中采用了两个步骤去保护：先通过酸解或氢解来去除保护的L-谷氨Γ-苄脂N-羧基酸酐γ位羧基的苄基保护基；再用如哌啶碱等裂解去除保护的L-赖氨酸的N-羧基酸酐的三氟乙酰基保护基。

在已报道的制备专利中，酪氨酸的N-羧基酸酐中的酚羟基没有保护，而酚羟基在聚合过程中容易氧化，从而增加副产物的发生，而且同时采用了两步去保护基的操作，使得操作繁琐，产率低，生产成本高。

发明内容

本发明要解决的技术问题是现有方法操作繁琐，产率低，生产成本高。

本发明解决上述技术问题的技术方案是提供一种格拉替雷的制备方法，包括以下步骤：

a、用L-丙氨酸N-羧基酸酐、保护的L-谷氨γ-苄脂N-羧基酸酐、保护的L-赖氨酸N-羧基酸酐与保护的酪氨酸N-羧基酸酐在碱催化下共聚合，制备得到保护的共聚物；

b、上述保护的共聚物再经酸解或氢解，得到格拉替雷粗品；

c、格拉替雷粗品再经纯化得到格拉替雷产品。

上述格拉替雷的制备方法中，步骤a所述的L-丙氨酸N-羧基酸酐、保护的L-谷氨γ-苄脂N-羧基酸酐、保护的L-赖氨酸N-羧基酸酐与保护的酪氨酸N-羧基酸酐的反应用量摩尔配比分别为：0.90～1.10︰0.30～0.36︰0.75～0.85︰0.20～0.24。

上述格拉替雷的制备方法中，步骤a所述的聚合反应的时间为10～30小时。

上述格拉替雷的制备方法中，所述保护的酪氨酸N-羧基酸酐的结构为：

其中R₁为苄基或为2-溴-苄氧基羰酰基(2-Br-Z)。

上述格拉替雷的制备方法中，所述的L-丙氨酸N-羧基酸酐的结构为：