[发明专利]产酯酵母液体培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种产酯酵母液体培养基及其制备方法，属于微生物技术领域。

背景技术

产酯酵母主要属于产膜酵母或假丝酵母，其中大多数为异性汉逊酵母，少数为小圆形酵母，能产生以酯香为主体的香味物质。产酯酵母菌在酱油及酱类生产中，产生特殊的香气，是酱香的主要来源。同时也可以在清香型白酒和浓香型白酒中广泛的应用，提高主体香气。

对产酯酵母的培养有固态和液态两种，不管哪一种培养方式，选择适宜的培养基都是最关键的。目前在实验室和实际大生产中比较常用的培养基主要有以下几种：（1）麦芽汁培养基：主要是将大麦芽自我糖化后的糖化液；（2）马铃薯葡萄糖培养基：主要是马铃薯浸汁与葡萄糖；（3）豆芽汁葡萄糖培养基：主要是黄豆发芽后的浸汁与葡萄糖；（4）察氏培养基：是一种化学合成培养基；（5）YPD：主要是酵母膏、蛋白胨、葡萄糖。综上这些培养基在实验室进行小型试验还是可以的，但如果在生产中应用，有些成分的市场价格比较昂贵，会造成相应产品的成本比较高；另外，如果经常用一种培养基对产酯酵母连续传代培养的话，会大大降低其产酯活性。因此，开发一种成本低廉、营养成分又全面的天然培养基，是稳定的产业化生产产酯酵母的关键。

发明内容

本发明目的是提供一种成本低廉、营养成分全面且适于大规模产业化使用的天然产酯酵母液体培养基，及该培养基的制备方法。

一种产酯酵母液体培养基，由以下重量份的成分组成：水150-170份，玉米面20-25份，大麦芽粉5-8份，河内白曲8-10份。

一种产酯酵母液体培养基的制备方法，包括如下步骤：

（1）量取150-170重量份的水，加热至58-62℃；

（2）称取20-25重量份的玉米面加入到上述58-62℃的水中，搅拌均匀并加热；

（3）将水和玉米面的混合物加热至沸腾，并保持沸腾25-35分钟，熬成玉米粥，然后降温至60℃-65℃；

（4）称取8-10重量份的河内白曲，作为糖化剂加入到已降温到60℃-65℃的玉米粥中搅拌均匀；

（5）称取约5-8重量份的大麦芽粉，加入到步骤（4）得到的混合物中，搅拌均匀，保持温度在60℃-65℃进行糖化，糖化时间为3-5小时；

（6）糖化完全后，加热至沸腾，并保持沸腾25-35分钟，进行杀菌和灭酶活，然后加酸调节pH至4-5；

（7）将步骤（6）的混合物降温至30℃，过滤分离得到糖化液和糖化混合物，待温度降至20℃时，测试糖化液的白利糖度，将白利糖度控制在10-12Brix；

（8）将步骤（7）的糖化液分装并高压蒸汽灭菌，冷却备用；糖化混合物分装到事先灭好菌的卡式罐中，备用。

所述制备过程优选在夹层锅中进行，以蒸汽和冷却水分别进行加热和冷却，保证受热面大,热效率高，加热均匀。

所述玉米面中过40目筛的占45%以上。

所述糖化是否完全的检测方法为：从步骤（5）糖化后的混合物中取适量到加有0.2ml的稀碘液的白板上进行糖化终点的判断，如果碘液变蓝色，说明糖化不完全，还要继续糖化，如果变红棕色，说明糖化完全，可以进行下一步操作。

所述步骤（6）中的酸是硫酸、盐酸。

所述步骤（7）中的过滤采用100目的棉布进行过滤。

所述步骤（7）中白利糖度偏高时，利用蒸馏水稀释调节；偏低时，加入葡萄糖进行调节。

所述高压蒸汽灭菌条件为温度115℃,时间15min。

相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：

（1）原料选择含有淀粉含量较高的玉米面，经糖化后确保有充足的碳源，同时又补充了一部分大麦芽粉，使得碳源、氮源以及无机盐等等成分种类更多、更全，从而更有利于产酯酵母生长繁殖。

（2）制备方法中的糖化工艺采用河内白曲做糖化剂，而不是糖化酶，河内白曲的酶系非常丰富，像酸性蛋白酶等等，可以将玉米面中的其他成分进行部分分解，增加了酵母可以利用的葡萄糖、氮源、无机盐以及其他各种生长因子；大生产生产产酯酵母不同于实验室对酵母形态、生理生化等的研究，培养基要较贫瘠会使得保存效果更好，而在生产中要使的菌越旺盛越好。因此，该工艺生产出来的培养基更适合于大生产的需要。

（3）本发明的原料选择和制作工艺成本低廉、应用效果极佳；使用该培养基30℃摇床培养产酯酵母，16-18小时即可达到旺盛期，出芽率达到最高，细胞数在4.5亿/ml左右，与普通培养基相比，同等培养条件下细胞数多3倍还多。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步阐述。