[发明专利]一种雷曼树酮A的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种从马达加斯加雷曼树叶中分离制备雷曼树酮A的方法。

背景技术

雷曼树酮A（Remangilone A），分子式为C₂₈H₃₈O₄，分子量为438.61，无色针晶，mp.186-187℃。雷曼树酮A是从白花菜科((Capparidaceae)马达加斯加雷曼树Physena madagascariensis Noronha ex Thouars的叶中分离得到一种三萜类化合物。药理研究表明，雷曼树酮A具有细胞毒活性，对乳癌细胞株(MDA-MB-435和MDA-MB-231)和正常的哺乳动物上皮细胞株(70N)的IC50为8.5μM、6.6μM和40.5μM。在2.3μM时能引起细胞凋亡(对照品紫杉醇paclitaxel在相同条件下诱导细胞凋亡的浓度为50nM)。

国内现有技术中，尚未见采用闪式提取和制备型液相色谱技术制备雷曼树酮A的生产工艺报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种雷曼树酮A的制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种雷曼树酮A的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取马达加斯加雷曼树叶，经粉碎处理，置于闪式提取器中，加8-12倍70-85%乙醇溶液，进行闪式提取，过滤得到提取液；

（2）提取液通过截留分子量为1000-3000的超滤膜超滤和截留分子量为300的纳滤膜浓缩，操作压力为0.8-2.5MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；

（3）采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的雷曼树酮A，紫外检测器在线监测，监测波长为261nm，收集雷曼树酮A组分；

（4）将雷曼树酮A组分进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得雷曼树酮A。

所述步骤（1）中闪式提取电压为120-160V，提取时间为60s-90s。

所述步骤（3）中制备型液相色谱以70-78%甲醇溶液为流动相。

本方法积极效果是：

（1）本方法采用闪式提取法，快速高效、低耗能、环保；

（2）本方法采用膜分离技术，能有效去除多种杂质，且不会破坏有效成分的生物活性；

（3）本方法采用制备型液相色谱，收率高、制备量大、制备周期短，解决了柱层析效率低而且污染严重的技术缺陷；

（4）本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取马达加斯加雷曼树叶，经粉碎处理，称取1kg，加8倍85%乙醇溶液，提取电压为120V，提取时间为80s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为3000的超滤膜超滤和截留分子量为300的纳滤膜浓缩，操作压力为0.8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的雷曼树酮A，以78%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为261nm，收集雷曼树酮A组分，进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，过滤、洗涤干燥即得雷曼树酮A，含量97.2%。

实施例2：

取马达加斯加雷曼树叶，经粉碎处理，称取1kg，加12倍70%乙醇溶液，提取电压为140V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为2000的超滤膜超滤和截留分子量为300的纳滤膜浓缩，操作压力为1.8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的雷曼树酮A，以78%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为261nm，收集雷曼树酮A组分，进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得雷曼树酮A，含量96.7%。

实施例3：