[发明专利]亲水的高蛋白结合的低荧光蛋白质印迹膜

权利要求书

1.一种用于检测蛋白质样品中的靶蛋白质的蛋白质印迹免疫检测试验，包括：

从所述蛋白质样品电泳分离所述靶蛋白质；

将所述分离的靶蛋白质转移到多孔聚合基质上，所述多孔聚合基质表面被包含丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的交联聚合涂层修饰，所述涂层使所述表面成为亲水性的；

封闭所述基质以防止抗体与所述基质表面的非特异性结合；

将所述基质与能够结合所述靶蛋白质的第一抗体孵育；

将所述基质与标记的第二抗体孵育，所述第二抗体能够与所述第一抗体的酶复合以提供可测量的信号；和

检测所述信号。

2.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中所述可测量的信号通过目测、化学发光或荧光检测进行检测。

3.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中所述表面被修饰的多孔聚合基质具有蛋白质结合能力，其通过IgG结合试验测定为约250-325μg/cm²。

4.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中所述多孔聚合基质的平均总有机碳水平低于1.5μg/cm²，并且其中由HPLC测定的可提取单体水平对于丙烯酰胺来说低于0.02μg/cm²，对于亚甲基双丙烯酰胺来说低于0.15μg/cm²。

5.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中所述多孔聚合基质具有背景荧光值，并且其中所述用聚合涂层修饰的基质在同样测量条件下显示约两倍于所述基质背景荧光值的背景荧光。

6.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中所述基质包含聚偏氟乙烯。

7.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的比例为约1∶1(质量/质量)。

8.权利要求1的蛋白质印迹免疫检测试验，其中用于涂覆所述表面的丙烯酰胺：亚甲基双丙烯酰胺单体反应物溶液中总的单体浓度在按质量计0.5％-1.5％之间。