[发明专利]一种栗木鞣花素的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药活性成分的制备方法，具体地是一种从榆绿木茎皮果实中制备栗木鞣花素的方法。

背景技术

栗木鞣花素（Castalagin），是从使君子科(Combretaceae)榆绿木变种Anogeissus acuminata(Roxb.ex DC.)Guill.&Pers.var.lanceolata Wall.ex C.B.Clarke的茎分离出的一种鞣质类化合物，为类白色粉末，分子式为C₁₉H₁₈O₄，分子量为934.34，结构式为

。

药理研究表明，栗木鞣花素具有抗高血压活性，静注本品降低自发性高血压大鼠的血压，这是由于抑制交感神经的活性和直接扩张血管所致；具有细胞毒活性，对黑色素瘤RPMI－7951的ED50为0.79μg/ml。

目前，国内对栗木鞣花素的研究较少，尚处于起步阶段。因此，研究出一种制备栗木鞣花素的方法是非常必要的，对于扩大药源以及榆绿木茎皮的综合利用具有很重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种操作简单，产品纯度较高的栗木鞣花素制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

一种栗木鞣花素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）超临界二氧化碳流体萃取榆绿木茎皮药材中的油脂类物质，残留物用乙醇超声提取后得到提取液；

（2）提取液浓缩，加入明胶溶液，离心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液；

（3）上大孔树脂纯化，水和乙醇水溶液洗脱，洗脱液浓缩；

（4）浓缩液经制备型液相色谱分离，冷冻干燥即得栗木鞣花素。

步骤（1）中所述超临界萃取温度为35-50℃，压力为25-30MPa，时间为30-60min。

步骤（1）中所述乙醇为60-80%的乙醇溶液溶液，用量为8-10倍量(V/W)，超声频率为45-65KHz，提取2-3次，每次0.5-1h。

步骤（2）中所述明胶溶液浓度为4.5-6%，丙酮水溶液浓度为50-70%。

步骤（3）中所述大孔树脂可选HPD-400或ADS-17型，洗脱剂为70%的乙醇水溶液。

步骤（4）中所述制备液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，甲醇体积百分比为68%，流速为25-50ml/min。

综上所述，本发明存在以下优点：本工艺采用超声波提取的方法提取栗木鞣花素，提高了提取效率；60-80%的乙醇溶液作为提取溶剂，减少了多糖的溶出；采用大孔树脂分离栗木鞣花素，成本低，分离效果好；制备液相色谱分离纯化，具有生产过程简单，易于实现工业化等优点。

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

榆绿木茎皮粉碎，取1kg，放入超临界萃取装置中，在温度为35℃，压力为25MPa下萃取30min，残留物加8L80%的乙醇溶液进行超声提取，超声频率为45KHz，提取3次，每次1h，过滤，合并提取液，低温浓缩，加入浓度为3%明胶溶液，搅拌至不再产生沉淀，离心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，滤除明胶，得到初步纯化液，上1LHPD-400大孔树脂柱，吸附完成后，先用4L水洗脱，再用4L70%乙醇溶液洗脱，控制流速为3.5ml/min，收集富含栗木鞣花素的洗脱液，浓缩，将浓缩液加甲醇配制成澄清溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以68%甲醇水溶液为流动相，控制流速为25ml/min，紫外在线检测，检测波长为229nm，收集目标流分，冷冻干燥即得栗木鞣花素1.68g，含量为96.4%。

实施例2：