[发明专利]一种提取肉苁蓉苷C的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离领域，特别是涉及一种提取肉苁蓉苷C的方法。

背景技术

肉苁蓉苷C（Cistanoside C），无定形粉末，是苯丙素苷类化合物，口服本品10mg/kg,对小鼠的性行为和学习行为低下具有显著保护作用。肉苁蓉苷C主要来源于列当科盐生肉苁蓉Cistanche salsa(C.A.Mey.)G.Beck的全植物。 

盐生肉苁蓉全草入药，味咸而性温，有温肾壮阳，润肠通便，补血之功效。主治阳痿遗精，腰膝冷痛，血虚便秘等症，近来的研究表明该种尚有防治老年性痴呆症之功效。

目前，国内学者对盐生肉苁蓉的化学成分研究尚处于起步阶段。经检索，尚未发现肉苁蓉苷C的相关分离制备方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种提取肉苁蓉苷C的方法。

为了解决上述技术问题，本发明的目的是这样来实现的：

（1）提取：以盐生肉苁蓉为原料，粉碎至20-80目，以水为提取溶剂，保温提取2-3次，过滤得到提取液；

（2）脱色：将提取液减压浓缩，过D941大孔树脂柱，收集下柱液；

（3）纯化：将下柱液减压浓缩，过中压硅胶柱分离，收集洗脱液，浓缩干燥得到粗提物；

（4）精制：将粗提物采用高速逆流色谱法进行分离纯化，流出物浓缩、低温干燥即得肉苁蓉苷C产品。

步骤（1）中所述提取溶剂的用量为10-20倍（V/W）药材重量。

步骤（1）中所述保温提取温度为60-80℃，保温提取时间为2-4h。

步骤（2）中所述减压浓缩温度为70-75℃。

步骤（3）中所述中压硅胶柱为不锈钢中压层析柱，柱长1200mm，内径为80mm，耐压20MPa，填料为160μm-200μm的硅胶。

步骤（3）中所述洗脱剂为体积比20:1-4:1二氯甲烷-甲醇混合溶剂。

步骤（4）中所述高速逆流色谱的溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水，其体积比为（4-8）：（3-5）：（4-7）：（3-6）。

本发明的优势是：以水为提取溶剂，成本较低；采用保温提取，提取的杂质少；采用高速逆流色谱法，样品损失少、产品纯度高，利于大生产操作。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

盐生肉苁蓉原料粉碎20目，取1kg，加15kg水加热至80℃，保温提取3h，提取液滤出，再加8kg水80℃保温2h，滤出提取液，再加6kg水80℃保温2h，合并提取液，在75℃温度下减压浓缩，过D941大孔树脂柱，收集下注液，将下注液减压浓缩后加少量硅胶拌匀低温烘干，装入不锈钢中压硅胶柱（柱长1200mm，内径为80mm，耐压20MPa，填料为160μm-200μm的硅胶），用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，其中二氯甲烷-甲醇的体积比为20:1-4:1，在洗脱过程中，以HPLC在线监测定位，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得粗提物1.3g；取石油醚、乙酸乙酯、乙醇、水按体积比8：5：7：6置于分液漏斗中混合均匀，静置分层，分离上下相，以上相为固定相，下相为流动相，取上述粗提物溶于下相中待用，开启高速逆流色谱仪，以3ml/min流速泵入流动相，待平衡后开始连续进样，转速为800rpm，收集肉苁蓉苷C流分，浓缩，低温干燥即得肉苁蓉苷C，经HPLC测定，纯度为97.7%。

实施例2：

盐生肉苁蓉原料粉碎20目，取1kg，加18L水加热至70℃，保温提取3h，提取液滤出，再加10L水80℃保温2h，合并提取液，在72℃温度下减压浓缩，过D941大孔树脂柱，收集下注液，将下注液减压浓缩后加少量硅胶拌匀低温烘干，装入不锈钢中压硅胶柱（柱长1200mm，内径为80mm，耐压20MPa，填料为160μm-200μm的硅胶），用二氯甲烷-甲醇进行梯度洗脱，其中二氯甲烷-甲醇的体积比为20:1-4:1，在洗脱过程中，以HPLC在线监测定位，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得粗提物1.5g；取石油醚、乙酸乙酯、乙醇、水按体积比4：3：4：3置于分液漏斗中混合均匀，静置分层，分离上下相，以上相为固定相，下相为流动相，取上述粗提物溶于下相中待用，开启高速逆流色谱仪，以3ml/min流速泵入流动相，待平衡后开始连续进样，转速为900rpm，收集肉苁蓉苷C流分，浓缩，低温干燥即得肉苁蓉苷C，经HPLC测定，纯度为98.7%。

实施例3：