[发明专利]一种利用碳纤维毡固定化铜绿假单胞菌处理含氮废水的方法

权利要求书

1.一种利用碳纤维毡固定化铜绿假单胞菌处理含氮废水的方法，其特征是，它包括以下步骤：

铜绿假单胞菌培养液的制备

     将保存在斜面上的菌株编号为CGMCC NO：1.00238的铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa接入到100mL无菌的种子培养基中，所述的种子培养基中各组分用量占种子培养基质量用量的百分比分别为：葡萄糖2%；蛋白胨0.5%；酵母膏0.3%；Na₂HPO₄·12H₂O 0.2%；KH₂PO₄ 0.1%；MgSO₄·7H₂0 0.025%；柠檬酸0.2%；pH5.8；在温度30℃的气浴恒温摇床上以150rpm培养48h，得到活化好的铜绿假单胞菌菌悬液，将得到的菌悬液存放在4℃冰箱中保存备用；

（2）碳纤维毡的预处理

将一块长宽均为100mm，厚度为5mm的碳纤维毡放入去离子水中煮沸30min；至自然冷却后，将得到的碳纤维毡置于温度4℃冰箱保存备用；

（3）碳纤维毡对菌株编号为CGMCC NO：1.00238的铜绿假单胞菌的固定化

将质量10g的聚乙烯醇和质量0.6g海藻酸钠加入到100mL蒸馏水中，用沸水浴加热使聚乙烯醇和海藻酸钠溶解得到混合溶液，在加热过程中用玻璃棒均匀搅拌混合溶液；混合溶液冷却至室温后，向其中加入质量1.0g粉末活性炭，混合均匀；向其中加入上述步骤（1）得到的20～40mL的铜绿假单胞菌培养液，混合均匀后得到预包埋菌液；将上述步骤（2）得到的碳纤维毡放入上述制得的预包埋菌液中浸泡30～60min；将浸泡后的碳纤维毡再放入饱和硼酸溶液中，在温度4℃冰箱中放置3h，使碳纤维毡凝胶化，上述饱和硼酸溶液含浓度为2%的氯化钙并经碳酸钠溶液调节pH值为7.0；将固定化铜绿假单胞菌的碳纤维毡用蒸馏水冲洗数次后，裁剪成长宽均为4mm的小块置于温度4℃冰箱中待用；使用固定化铜绿假单胞菌的碳纤维毡前，用吸水纸吸净表面的水分即可；

（4）固定化菌株编号为CGMCC NO：1.00238的铜绿假单胞菌的碳纤维毡对含氮废水的处理

将200～600块上述步骤（3）制得的长宽均为4mm的固定化菌株编号为CGMCC NO：1.00238的铜绿假单胞菌的碳纤维毡小块加入到含氮废水中，对含氮废水进行连续处理，上述含氮废水水质如下：硝酸盐NO₃^-：0.5～3.5mg/L，化学需氧量COD：350～460mg/L，溶解氧量：6.5mg/L；控制含氮废水连续进水，进水流速为1mL/min；于温度20℃，连续处理含氮废水240h，每隔24h检测含氮废水的硝酸盐NO₃^-和化学需氧量COD去除率，实现含氮废水的处理。

2.根据权利要求1所述的一种利用碳纤维毡固定化铜绿假单胞菌处理含氮废水的方法，其特征是，所述铜绿假单胞菌来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为CGMCC NO：1.00238。