[发明专利]利用线粒体SCAR标记鉴别温室白粉虱和烟粉虱的引物及方法无效
| 申请号： | 201310192726.5 | 申请日： | 2013-05-22 |
| 公开（公告）号： | CN103255222A | 公开（公告）日： | 2013-08-21 |
| 发明（设计）人： | 褚栋;陶云荔;国栋;姜德锋 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 线粒体 scar 标记 鉴别 温室 白粉 烟粉虱 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用线粒体基因mt COI标记鉴别温室白粉虱和烟粉虱的引物，所述引物为一对，分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
2.一种利用线粒体基因mt COI标记鉴别温室白粉虱和烟粉虱的方法，其特征在于，步骤如下：
（1）提取待鉴定样品的基因组DNA，得基因组DNA溶液；
（2）以步骤（1）制得的基因组DNA为模板，利用上述引物对基因组DNA中的线粒体基因mt COI进行PCR扩增，制得PCR扩增产物；
（3）对步骤（2）制得的PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，当PCR产物电泳图谱显示被测样品有752bp的一条条带时，则该被检测样品为温室白粉虱；当PCR产物电泳图谱显示无752bp的条带时，则该被检测样品为烟粉虱。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR扩增的扩增体系为：
基因组DNA溶液2.5μl，20μM引物0.5μl，5U/μl Taq酶0.25μl，10×Taq缓冲液2.5μl，10mM dNTP0.5μl，ddH20补至25μl；
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR扩增的扩增条件如下：
94℃预变性5分钟；94℃变性30秒，50℃退火30秒，72℃延伸30秒，进行35个循环；72℃延伸7分钟。
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