[发明专利]一种制备丹酚酸A的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备丹酚酸A的方法，特别涉及一种制备高纯度丹酚酸A的方法。 

背景技术

丹参(salvia miltiorrhiza Bunge)是一种多年生草本植物，为唇形科鼠尾草属，其干燥根是中医常用的一味历史悠久的活血化瘀药，具有“行气止痛，宁心安神，清热凉血，活血化瘀，养血益气，祛痹健脚，调经止崩，解毒排脓”八大功效。丹参药材常用于治疗心绞痛、高血压、冠心病及中风等心脑血管疾病。以丹参饮片或者丹参粗提取物入药的中药制剂有很多，如复方丹参片、复方丹参滴丸、丹参注射液、香丹注射液等，另外也有利用从丹参中分离得到纯化合物或其盐类制成的制剂，如丹参素钠注射液、丹酚酸B针剂等。近年来，随着药理研究的深入，丹酚酸A的多种药理活性被发现。如甄永苏等发现丹酚酸A具有抗肿瘤活性；杜冠华等发现丹酚酸A对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，对小鼠脑缺血再灌注引起的脑损伤有保护作用，对樟柳碱或冬莨菪碱引起的小鼠记忆获得障碍有明显的改善作用等；陶文(Tao Wen)等发现丹酚酸A对四氯化碳引起的大鼠肝损伤具有保护作用。李志刚等还开发了治疗心血管疾病的丹酚酸A片剂及注射剂。 

丹参的水溶性成分多具有酚酸性结构，如丹酚酸A、B、C、D、E等，其中以丹酚酸B含量最高，具有广泛的药理作用，如保护心肌缺血缺氧、改善微循环、中枢镇静、抑制血小板聚集和血栓形成等，临床上已将其用于冠心病、心 绞痛、心肌梗塞、缺血性中风等疾病的治疗，药效显著。其中以丹酚酸A的药理活性最高(杜冠华[基础医学与临床，2000，20(5)：10～14]、胡义扬[中药药理学报，1997，18(5)：478-4801])。 

目前，丹参水溶性成分的获取多采用水提醇沉、乙酸乙酯萃取等方法，文献(中成药，2007，29(1)：143-144；中草药，2007，38(6)：843-846；中草药，2007，38(4)：542-545；时珍国医国药，2007，18(5)：1186-1187)均有详细阐述，但所得产品或为多酚酸混合物(构效关系并不明晰)，或再经过多步纯化得到某一单一药效物质，如，(1)CN1342638A采用水提一双柱吸附洗脱.溶剂萃取等步骤纯化丹参素；(2)CN1303052C采用水或醇提、前体转化、超滤除杂、溶剂萃取和正相色谱等多步纯化丹参素；(3)CN1751706A采用碱提、酸化、醇沉、双柱(树脂+聚酰胺)吸附洗脱和结晶等多步纯化丹参素；(4)CN101012163A采用树脂吸附洗脱.重结晶或二次层析纯化丹参素；(5)CN1425659采用水提、酸化、柱层析和干燥等数步分离纯化丹酚酸B。上述方法均以单一组分为提取纯化目标，其它功效成分并未涉及。虽然CN1305866C采用两次沸水提取，高速离心，膜滤除杂或溶剂萃取，以及反相色谱分离等多步得到丹酚酸A、B和原儿茶醛三种组分，但纯度和收率等参数未报道，且为分批处理，每次上样5ml，处理量小，操作复杂，生产效率低。因此，目前尚无一种操作简便，提取效率和产品纯度与处理量均较高，并可同时分离纯化多种丹酚酸尤其是丹酚酸A的方法。 

现有文献中公开了丹酚酸A提取纯化的工艺方法，虽然能够得到丹酚酸A，但研究重心都是落在如何将丹酚酸A与杂质的分离上，存在着提取率很低，无法在工业化生产中实现，也无法得到“成药”级的丹酚酸A的缺陷，这成为了摆在很多科研工作者面前的一道难关。 

中国专利CN1397276A，2002年公开了水或醇提、树脂层析，再经硅胶柱 层析的纯化制备丹酚酸A的方法；中国专利CN15138481A，2003年公开了采用水温浸、离心、超滤、调酸、有机溶剂萃取再经反相柱层析制备丹酚酸A的方法；中国专利CN1887849A，2006年公开了水或醇提、柱层析后调pH值、有机溶剂萃取的方法。这些方法都是从丹参中直接将丹酚酸A提取出来再设计一系列的纯化方法得到丹酚酸A。由于丹参中丹酚酸A含量低，使得这些方法的提取率很低，无法实现工业化生产，也无法开发出应用于临床的药物制剂。 

中国专利CN1830947A，2006年公开了丹参水提或醇提、高温高压反应、柱层析等纯化方法，该方法采用高温高压条件是101-140℃，压力是0.01-0.25MPa，很显然这在实际操作中无法实现，因为温度与压力具有一定的关系，而该申请显然不符合这种关系，因此无法实现操作。