[发明专利]一种水稻直链淀粉含量控制基因Wx的基因型鉴定引物及鉴定方法有效
| 申请号： | 201310187877.1 | 申请日： | 2013-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN103276071A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 蔡海亚;徐得泽;吴建平;游艾青;周雷;程建平;赵锋 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院粮食作物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430064 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 水稻 直链 淀粉 含量 控制 基因 wx 基因型 鉴定 引物 方法 | ||
1.一种水稻直链淀粉含量控制基因Wx的基因型鉴定引物，分别为：
WxGF：TACAAATAGCCACCCACA；
WxGR：GGGAAACAAAGAATTATAAACATATATGTACAC；
WxTF：CATCAGGAAGAACATCTGCAAGT；
WxTR：GATCAGCCTAACCAAACA。
2.一种水稻直链淀粉含量控制基因Wx的基因型鉴定方法：其步骤如下：
1）水稻DNA的提取：CTAB方法提取水稻DNA；
2）PCR扩增：
PCR反应体系为20μL，含2.0μL 10×Buffer， 10 mmol/L dNTPs 1.0μL，4条10 μmol/L引物各0.5μL， 5U/μL Taq酶0.2μL，2.0μL模板DNA，12.8μL ddH2O；
PCR反应程序：94℃预变性5min；94℃变性1min，58℃退火1min，72℃延伸1min，共35个循环；72℃延伸10min，扩增产物在2% (w/v)琼脂糖凝胶中电泳，用凝胶成像仪扫描记录结果；
所述的4条引物为：
WxGF：TACAAATAGCCACCCACA；
WxGR：GGGAAACAAAGAATTATAAACATATATGTACAC；
WxTF：CATCAGGAAGAACATCTGCAAGT；
WxTR：GATCAGCCTAACCAAACA；
3）结果判断：
4条引物等量混合扩增待检测品种基因组DNA，根据扩增条带类型判断基因型，In1为G碱基的G型等位基因材料扩增出207bp和387bp 2条条带，T型等位基因材料扩增出235bp和387bp 2条条带，GT杂合型则扩增出207bp、235bp和387bp的3条条带。
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