[发明专利]邻苯二甲酸二丁酯残留检测试剂盒

权利要求书

1.一种邻苯二甲酸二丁酯残留检测试剂盒，其特征在于包括如下试剂： DBP标准品:1mg/mL；包被抗原DBAP-BSA：1μg/mL；包被缓冲液：0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液；封闭液：5%的SMP；洗涤缓冲液：含0.05% Tween-20的PBS；竞争反应液:含10%DMF，1.6%NaCl，0.02%KCl的0.01mol/L pH6.8的PBS；DBP单抗：1.4mg/mL；抗体稀释液：含0.1% BSA的PBS；亲和素标记的羊抗小鼠IgG；过氧化物酶标记的亲和素；OPD底物显色液；终止液。

2.使用权利要求1所述试剂盒检测邻苯二甲酸二丁酯残留量的方法，其特征在于包括如下步骤：

1）酶标板包被DBAP-BSA,用包被缓冲液稀释为0.5 μg/mL，100 μL/孔，4℃过夜；

2）酶标板用洗涤缓冲液洗涤3次，每孔加入250 μL封闭液，37℃封闭1小时；

3）酶标板用洗涤缓冲液洗涤3次，加入不同浓度的DBP标准品50μL，再加入50 μL邻苯二甲酸二丁酯单抗，另设阳性对照孔A，25℃孵育1.5小时；

4）酶标板用洗涤缓冲液洗涤3次，加入亲和素标记的羊抗小鼠IgG100 μL，37℃孵育1小时；

5）酶标板用洗涤缓冲液洗涤3次，加入过氧化物酶标记的亲和素50μL，37℃孵育30分钟；

6）酶标板用洗涤缓冲液洗涤3次，加OPD显色液100μL室温避光20分钟；

7）每孔加入50μL终止液，用酶标仪测定492nm处标准品的吸光度，根据测得标准品吸光度计算出抑制率，以邻苯二甲酸二丁酯浓度的自然对数为横坐标，对应的抑制率I为纵坐标，制作标准曲线； 

8）测得待测样品吸光度，对照标准曲线即可确定待测样品中邻苯二甲酸二丁酯的含量。