[发明专利]一种植物组织培养时的脱毒方法

说明书

技术领域

本发明生物技术领域，具体涉及到一种植物组织培养时的脱毒方法。

背景技术

植物病毒分布广、危害大。特别是近年来，我国从国外引进各种花卉品种繁多，种植面积不断的扩大，再加上不规范的繁殖技术，使病毒病开始流行，严重影响了中国花卉产业的发展。目前，国内外多用组织培养脱毒方法来阻止病毒病的继续传播并以此提高植物的产量和质量。植物组织培养脱毒方法有茎尖培养脱毒、热处理脱毒、冷处理脱毒、化学药剂处理脱毒、花药培养脱毒、愈伤组织脱毒、珠心胚培养脱毒、茎尖微体嫁接脱毒等.其中由于茎尖培养脱毒效果好，是目前植物无病毒苗培育应用最广泛、最重要的一个途径。

茎尖培养脱毒原理：在染病毒植株体内，病毒分布并不均匀，在生长点病毒含量最低。病毒通过维管束和胞间连丝传播，在分生区内无维管柬，病毒扩散慢，加之植物细胞不断分裂增生，所以病毒含量少，在茎尖生长点几乎检测不出病毒，因此切取茎尖愈小愈好。但实际操作中茎尖取太小不易培养成活，过大又不能去毒，而且茎尖如果在空气中暴露时间过长，就会因失水引起茎尖死亡。

热处理脱毒的原理是病毒由蛋白质组成，高温可以使蛋白质变性，所以通过高温钝化病毒。高温热处理是在恒温箱内进行，将耔球或小苗放入恒温箱中。起点温度可稍低些。逐渐升至处理温度.一般在35-54℃条件下热处理几小时、几天甚至几个月热处理。热处理脱毒缺陷是不能脱除所有病毒。

愈伤组织脱毒的原理是愈伤组织的某些细胞不带病毒，这是由于病毒的复制速度赶不上细胞的增殖速度，或者是有些细胞通过突变获得了抗病毒的抗性。具体方法是通过花卉各种器官或组织诱导产生愈伤组织，然后从愈伤组织再诱导分化产生芽，长成小植株，可以得到无病毒苗。这种方法的缺陷是植株遗传性不稳定，可能会产生变异植株，并且一些植物的愈伤组织尚不能产生再生植株。

低温处理脱毒的原理目前还不清楚，这方面的报道也不多见。在超低温处理的过程中易受冻害而死亡。

发明内容

本发明的目的是提供全新的一种植物组织培养时的脱毒方法。具体包括：植物组织培养在进行脱毒流程时，同时采取热处理+茎尖脱毒处理。热处理与茎尖培养相结合脱毒，对于单用茎尖或热疗法难以脱除的病毒，先进行热力处理，使植株茎尖无毒化，再采用茎尖组织培养法，这样有效的提高脱毒成功几率。

本发明是通过以下技术方案来实现的：

1、一种植物组织培养时的脱毒方法，技术方案中包括如下步骤：选择优良品种→同时通过热处理+茎尖脱毒处理→培育试管苗→脱毒苗培养→原球茎→切割→小块→大块→液体振荡培养→原球茎→培育试管苗→培养至试管苗生根→壮苗培养→移栽→温室栽培→商品植物。

2、所述的一种植物组织培养时的脱毒方法，技术方案中如果试管苗经过病毒检测未脱毒时，再经过热处理+茎尖脱毒，然后再按上述工艺流程培养出商品植物。

本发明既有如下优点：

1、本发明所提出的植物组织培养脱毒方法措施独特，而且容易实施。

2、通过实施本发明，同时采取热处理+茎尖脱毒处理。热处理与茎尖培养相结合脱毒，对于单用茎尖或热疗法难以脱除的病毒，先进行热力处理，使植株茎尖无毒化，再采用茎尖组织培养法，这样有效的提高脱毒成功几率。

3、本发明工艺简单，可在短时间内获得同一株系的多棵脱毒苗，降低生产成本，有效地提高病毒脱毒率，具有扩繁速度快，扩繁周期短，苗系品质高等特点，为植物组培的工厂化生产提供一种周期短、繁殖率高、成本低廉的脱毒苗快繁方法。

附图说明

图1所示的是本发明中植物组织培养时的脱毒及实施工艺流程。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。

一种植物组织培养时的脱毒方法，具体实施方式如下：

1、选择优良品种。

2、同时通过热处理+茎尖脱毒处理。

3、培育成试管苗。

4、培育出脱毒苗培养。

5、利用原球茎切割成小块或大块，通过液体振荡培养。

6、培育原球茎。

7、培育试管苗。

8、培养至试管苗生根。

9、壮苗培养。

10、移栽。

11、温室栽培。

12、商品植物。

上述工艺流程培育出试管苗后经过病毒检测未脱毒时，再同时经过热处理+茎尖脱毒，然后再按上述工艺流程培养出商品植物。