[发明专利]一种从泡桐树叶中提取熊果酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从泡桐树叶中提取熊果酸的方法，尤其是一种从植物中提取熊果酸的制备方法。

背景技术

熊果酸，别名：乌苏酸；乌索酸。英文名：ursolic acid。分子式：C₃₀H₄₇O₃。分子量：455.6929。CAS号：77-52-1。

结构式如下：

现代研究表明，熊果酸具有抗炎、保湿、促进皮肤细胞生长、美白等多种作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。

研究表明，熊果酸主要存在于多种植物中，以泡桐树叶中的含量最为丰富，泡桐为玄参科泡桐属植物泡桐(Paulownia fortunei(Seem.)Hemsl)或毛泡桐(P.tomentosa(Thunb.)Steud)。

现有技术中，制备高纯度熊果酸采用的方法均为传统的加热提取，苯、石油醚等有机溶剂反复处理，工艺落后，产品纯度低、能耗大、污染严重，已远远不能适应现代循环经济的要求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的熊果酸的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

一种从泡桐树叶中提取熊果酸的方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：取泡桐树叶，按每g树叶加入5mL的比例加入水，加入纤维素酶，在温度40-50℃、pH值3-6、酶量10-20U/g树叶的条件下酶解2-5小时，加热至沸腾并煎煮0.5-1.5小时，滤过，取滤液，通过AB8大孔吸附树脂吸附，以30％乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，通过D101大孔吸附树脂吸附，以70％乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，滤液通过反渗透膜浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶、洗涤，干燥即得。

所述酶解的条件为：温度45℃、pH值4、酶解3小时。

所述煎煮的时间为1小时。

所述强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201×7型、201×4型、D201型阴离子交换树脂中的一种。

所述强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001×7型、001×4型、D001型阳离子交换树脂中的一种。

所述反渗透膜选自醋酸丙酸纤维素膜、芳香聚酰胺膜、三醋酸纤维复合膜中的一种。

制备所得熊果酸可采用下列方法检测：

试验例1HPLC法测定熊果酸纯度

色谱条件

色谱柱：十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相：甲醇-5％磷酸水溶液(90∶10)；流速：1ml/分钟；检测波长：220nm；柱温：30℃。

测定方法

精密称取熊果酸2mg，置于50mL量瓶中，加入甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μL，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。

采用本发明制备熊果酸，利于大生产操作，能耗小，污染小。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取泡桐树叶(来源于玄参科泡桐属植物泡桐Paulownia fortunei(Seem.)Hemsl的树叶)10Kg，按每g树叶加入5mL的比例加入水，加入纤维素酶，在温度40℃、pH值3、酶量10U/g树叶的条件下酶解2小时，加热至沸腾并煎煮0.5小时，滤过，取滤液，通过AB8大孔吸附树脂吸附，以30％乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，通过D101大孔吸附树脂吸附，以70％乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，通过强碱性201×7型苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过001×7型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，滤液通过醋酸丙酸纤维素膜反渗透膜浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶、洗涤，干燥即得，干燥即得无色针晶-熊果酸42.6g，经HPLC检测，纯度为98.4％，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2