[发明专利]一种从生地黄中制备益母草苷的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种从生地黄中制备益母草苷的方法。

背景技术

益母草苷为玄参科地黄中环烯醚萜类成分，有抗癌、神经保护、抗炎、利尿、降血糖及抗肝炎病毒等生理活性，易溶于水、甲醇、乙醇，难溶于氯仿、丙酮。

现有制备高纯度益母草苷的方法采用硅胶柱分离或制备液相分离。如文献 “地黄环烯醚萜苷类成分的制备及血清药物化学研究”公开的方法为硅胶色谱。由于硅胶柱分离对产品死吸附严重，试剂用量大，工业化放大难以重现；而制备液相生产，产出量较小，成本较高。

发明内容

本发明的要解决的技术问题是提供一种制备益母草苷的高效、简便方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的：

一种从生地黄中制备益母草苷的方法，其特征在于以下步骤：

a新鲜地黄粉碎，榨汁，所得汁液加入等体积95%乙醇，充分搅拌，离心，离心液浓缩，浓缩液加入大孔树脂中吸附，3-8倍柱体积20-30%乙醇溶液洗脱，洗脱液用纳滤膜浓缩，减压干燥得粗提物；

b上述粗提物加入乙酸乙酯充分溶解，过滤，过氧化铝柱，下柱液回收试剂采用高速逆流色谱纯化，紫外检测器在线监测，根据图谱收集目标成分，回收试剂，减压干燥即得。

所述的大孔树脂可选D101、AB-8、HPD100或ADS-21中的一种。

所述的纳滤膜为截留分子量100-300的中空纤维素膜。

所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选乙酸乙酯、甲醇、水溶剂系统，混合比例1-9:1-4:1-9，取上相做固定相，下相做流动相。

本发明制备益母草苷，方法操作简单，产品收率高，溶剂利用率高，易于实现工业化生产。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明。

实施例1：

新鲜地黄粉碎10kg，榨汁，所得汁液加入等体积95%乙醇，充分搅拌，离心，离心液浓缩，浓缩液上5LD101大孔树脂柱，完全吸附后，取20L20%的乙醇洗脱，收集洗脱液，加入截留分量200的中空纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液减压干燥得80g干粉。取乙酸乙酯、甲醇、水按4:1:5比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱管中做固定相，开动主机，转速900rpm，同时泵入下相做流动相，平衡后，设置流速3ml/min，同时用流动相溶解浓缩液，注入高速逆流色谱仪，紫外检测器在线检测，收集流分，连续制备，减压干燥，得益母草苷5.6g，经HPLC检测，含量98.7%。

实施例2：

新鲜地黄粉碎10kg，榨汁，所得汁液加入等体积95%乙醇，充分搅拌，离心，离心液浓缩，浓缩液上5LAB-8大孔树脂柱，完全吸附后，取25L30%的乙醇洗脱，收集洗脱液，加入截留分量300的中空纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液减压干燥得67g干粉。取乙酸乙酯、甲醇、水按3:1:5比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱管中做固定相，开动主机，转速800rpm，同时泵入下相做流动相，平衡后，设置流速2ml/min，同时用流动相溶解浓缩液，注入高速逆流色谱仪，紫外检测器在线检测，收集流分，连续制备，减压干燥，得益母草苷4.1g，经HPLC检测，含量95.1%。

实施例3：

新鲜地黄粉碎10kg，榨汁，所得汁液加入等体积95%乙醇，充分搅拌，离心，离心液浓缩，浓缩液上5L ADS-21大孔树脂柱，完全吸附后，取35L25%的乙醇洗脱，收集洗脱液，加入截留分量200的中空纤维素纳滤膜浓缩，浓缩液减压干燥得73g干粉。取乙酸乙酯、甲醇、水按5:2:9比例混合，充分分层后，取上相注入高速逆流色谱管中做固定相，开动主机，转速850rpm，同时泵入下相做流动相，平衡后，设置流速3ml/min，同时用流动相溶解浓缩液，注入高速逆流色谱仪，紫外检测器在线检测，收集流分，连续制备，减压干燥，得益母草苷5.2g，经HPLC检测，含量96.2%。