[发明专利]一种嗜热酯酶及其在降解PAEs中的应用有效
| 申请号： | 201310178873.7 | 申请日： | 2013-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN104152425A | 公开（公告）日： | 2014-11-19 |
| 发明（设计）人： | 范翔;张晓彦;李骋远;邢帅;许建和 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/18 | 分类号： | C12N9/18;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;A62D3/02;C12R1/19;C12R1/01;A62D101/28 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 钟华;沈利 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 嗜热酯酶 及其 降解 paes 中的 应用 | ||
1.一种分离的酯酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种酯酶融合蛋白，其特征在于，所述的酯酶融合蛋白是氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的酯酶添加一肽段后的融合蛋白，所述的肽段是表达亲和层析标签His-tag。
3.一种分离的编码权利要求1所述的酯酶的核酸，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.一种包含如权利要求2所述的核酸的重组表达载体。
5.一种重组表达转化体，其特征在于，该重组转化体包含如权利要求4所述的重组表达载体。
6.一种邻苯二甲酸酯的生物酶降解法，其特征在于，包括以下步骤，在含水介质中，在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酯酶或其融合蛋白的催化下，邻苯二甲酸酯进行水解反应，形成邻苯二甲单酸和醇，再形成邻苯二甲酸和醇。
7.如权利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述的邻苯二甲酸酯是如式（Ⅰ）所示的化合物，邻苯二甲单酸是如式（Ⅱ）所示的化合物，邻苯二甲酸是如式（Ⅲ）所示的化合物，
其中，R1和R2分别或同时代表C2-C10直链烷基。
8.如权利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述含水介质为磷酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、巴比妥钠缓冲液或者硼酸-硼砂缓冲液。
9.如权利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述的含水介质还含有能够溶解邻苯二甲酸酯的有机溶剂，所述的有机溶剂和含水介质的体积比为1:1000-1:9。
10.如权利要求6所述的生物酶降解法，其特征在于，所述水解反应的反应温度是37-60℃，所述水解反应的反应时间是1分钟-24小时。
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