[发明专利]具有抗肿瘤活性的多肽及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的多肽及其用途，属于抗肿瘤药物研发与应用技术领域。

背景技术

据申请人了解，癌症在全世界已成为导致人类死亡的第二大病因。恶性肿瘤是危害人类健康的最危险的疾病之一，在我国，肿瘤引起的死亡率在所有病因中高居第一位，占17.9％，且发病率呈上升趋势。寻找有效的抗肿瘤药物与方法，彻底攻克癌症，是全世界医学界最重要的研究课题之一。

肿瘤的治疗强调综合治疗的原则，化疗是其中一个重要手段。近年来抗肿瘤药物的研究取得了飞速发展，出现了一些新型的抗肿瘤药物，作用于肿瘤发生发展的不同环节，有效地延长了肿瘤患者的生存时间、提高了生活质量。但同时也出现了很多问题：肿瘤耐药性不断增强，导致抗肿瘤药物的使用剂量不断增加，对机体的毒副作用大大增强。现有研究发现，化学药物的治疗效果以及肿瘤细胞耐药性的产生均与细胞内一些基因表达水平有关，控制细胞内某些基因的表达有助于抑制肿瘤细胞耐药性的产生，并大大提高化学药物的治疗效果，降低因药物对机体的毒副作用，提高患者生存质量，为更多肿瘤患者带来福音。

JWA基因，即ARL6IP5基因(GenBank:AF070523.1,1998;LOCUS:AF070523，NM_006407)是本专利发明人周建伟等首先从培养的原代人气管和支气管上皮细胞中分离克隆的受全反式维甲酸(ATRA)诱导的基因，编码一种新的细胞骨架结合蛋白。本专利发明人带领课题组成员多年来一直围绕JWA基因的结构、功能及其相互关系开展研究工作，取得了一系列原创性有意义的研究成果：（1）率先证明和提出JWA基因编码的JWA蛋白是一种新的微管相关蛋白(MAPs)，该蛋白能与微管蛋白α和β亚单位结合，并在对环境物理化学因素(如冷休克、热休克、紫杉醇等)的应答中表现出与微管蛋白α和β亚单位同步的动力学变化(聚合或解聚)；（2）发现JWA蛋白参与细胞有丝分裂过程，并对微管的动力学稳定性有调节作用；（3）JWA蛋白可以通过MAPK信号通路、微丝的解聚和重组来调节肿瘤细胞迁移。肿瘤细胞迁移是肿瘤浸润和转移的必要条件，肿瘤细胞的迁移能力也与转移潜能有关。本专利发明人经研究发现，将JWA基因表达缺陷的人或小鼠黑色素瘤细胞(A375、B16F10)通过尾静脉注入小鼠体内后，其形成的肺转移灶明显高于空载对照鼠。同时，在体外模型研究中也发现，JWA基因表达缺陷的黑色素瘤细胞株，其迁移、侵袭、粘附能力也都明显高于载体对照的细胞。后续深入的机制研究证明，JWA基因对肿瘤细胞转移相关多种恶性表型的影响是通过负性调节核转录因子Sp1的表达后、进一步抑制integrin α_Vβ₃信号通路分子的活性而实现的。

从现有JWA蛋白相关研究可知，由JWA基因表达获得的JWA蛋白具有抑制肿瘤细胞粘附、浸润、转移和抑制肿瘤血管生长等功能，规模化生产活性JWA蛋白势在必行。然而，本专利发明人在实践研究中发现，目前采用宿主表达系统难以获得纯化的JWA蛋白，通过该途径以纯化的JWA蛋白开展体内外试验的可行性差。

此外，据申请人所知，整合素(integrin)是广泛存在于细胞膜表面的糖蛋白受体家族分子，主要介导细胞与细胞外基质(ECM)以及细胞与细胞之间的粘附。整合素分子是由α和β亚基通过非共价键连接构成的二聚体分子，不同的α和β亚基的组合决定了配体的特异性。其中，integrin α_Vβ₃的功能显得尤为重要。integrin α_Vβ₃在许多恶性肿瘤细胞表面表达增高，而在正常组织中表达较低或者不表达，并且能够被配体分子中的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列(RGD)所特异性识别。