[发明专利]叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.一种叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金纳米颗粒的制备方法，包括：

（1）配制NaOH溶液，氮气保护下，提前预热到80°C，然后将Fe源溶解于盐酸中，排除空气，再加入到提前预热好的NaOH溶液中，并于氮气保护下搅拌反应2小时；反应结束后，自然冷却至室温，将沉淀洗涤分离后，得到Fe₃O₄纳米颗粒；

（2）将叶酸和1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐EDC分别溶于溶剂中，混合，搅拌活化2-3h，然后滴加到第5代聚酰胺/胺树状大分子G5.NH₂溶液中，搅拌反应2-3d，透析，冷冻干燥，得到G5.NH₂-FA；其中G5.NH₂的表面氨基、叶酸、EDC的摩尔比为22:1:10；

（3）将HAuCl₄·4H₂O水溶液加入G5.NH₂-FA溶液中，搅拌10-30min，然后加入硼氢化钠NaBH₄溶液，搅拌反应1-2h，透析，冷冻干燥，得到{(Au⁰)₅₀-G5.NH₂-FA}DENPs纳米颗粒；其中G5.NH₂-FA和HAuCl₄·4H₂O摩尔比为1:50；

（4）通过静电层层自组装的方法，在Fe₃O₄纳米颗粒表面一次组装聚谷氨酸PGA、聚赖氨酸PLL和聚谷氨酸PGA三层膜，然后进一步组装{(Au⁰)₅₀-G5.NH₂-FA}DENPs，组装结束后，进行EDC交联反应，反应时间为15-20h，离心，洗涤，得到Fe₃O₄/PGA/PLL/PGA/{(Au⁰)₅₀-G5.NH₂-FA}DENPs；其中每次组装吸附时间为15-20min，Fe₃O₄纳米颗粒溶液、PGA溶液、PLL溶液、PGA溶液的体积比为0.5:1:1：1；

（5）将HAuCl₄·4H₂O溶液加入上述合成的Fe₃O₄/PGA/PLL/PGA/{(Au⁰)₅₀-G5.NH₂-FA}DENPs溶液中，超声反应5-8min，再加入水合肼N₂H₄·H₂O超声反应5-8min，重复6-7次，离心，洗涤，得到Fe₃O₄/Au-FA纳米材料，将Fe₃O₄/Au-FA纳米材料分散在水中，然后加入三乙胺，振荡混合，再滴加入乙酸酐，振荡反应18-20h，离心，洗涤，再分散在水中，即得表面乙酰化的Fe₃O₄/Au-FA纳米颗粒，其中HAuCl₄·4H₂O溶液、Fe₃O₄/PGA/PLL/PGA/{(Au⁰)₅₀-G5.NH₂-FA}DENPs溶液、水合肼N₂H₄·H₂O溶液的体积比为40μL：2mL：40μL；三乙胺、乙酸酐与树状大分子中的表面NH₂摩尔比为11:5:1。

2.根据权利要求1所述的一种叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中NaOH溶液的浓度1M，体积为250mL；盐酸的浓度为0.4M，体积为25mL；Fe源为摩尔比为2:1的FeCl₃·6H₂O和FeCl₂·4H₂O。

3.根据权利要求1所述的一种叶酸修饰的多功能靶向造影剂磁性氧化铁/金纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中溶剂为二甲基亚砜DMSO。