[发明专利]半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN与癌胚抗原的联合应用

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，涉及半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN与癌胚抗原的联合应用。

背景技术

胃癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一，死亡率居各恶心肿瘤的第二位。目前全球每年新发胃癌九十三万四千例，其中有近四十万在中国，患病和死亡率均超过世界平均水平的两倍。随着胃镜及现代影像学技术的应用，早期胃癌的诊断率已提高到百分之十左右，早期治疗治愈率达到百分之九十五，但目前中国住院病例中超过九成是中晚期才就医，五年生存率不到五分之一。提高胃癌的总体疗效很大程度上取决于早发现、早诊断、早治疗及治疗后的复发检测，因此寻找高灵敏度和高特异性的肿瘤标志物对胃癌的早期诊断和复发监控有重大意义。

据文献报道胃肠间质瘤（GIST）发病率为（1-2）/10万，占胃肠道肿瘤的0.1%-0.3%。在美国每年新发病例为4000-6000例，年发病率约为（11-14.5）/100万。发病高峰位于50-70岁之间人群，40岁以下少见，青少年罕见。GIST大部分发生于胃（50～70%）和小肠（20～30%），结直肠约占10～20%，食道占0～6%，肠系膜、网膜及腹腔后罕见。GIST病人20-30%是恶性的，第一次就诊时约有11～47%已有转移，转移主要在肝和腹腔。胃肠道间质肿瘤中存在c-kit基因功能获得性突变及c-kit蛋白产物CD117的表达。研究发现GIST发生主要与C-KIT基因突变导致酪氨酸激酶持续活化使突变细胞增殖失控有关。80-88%GIST的发生源于C-KIT基因功能获得性突变，即CD117。据2008年中国胃肠间质瘤诊断治疗共识意见，病理诊断流程对疑似GIST应做组织免疫组化检查，CD117阳性则可确诊，阴性再做C-KIT突变检测，阳性为GIST，阴性再进行PDGFR基因检测，阳性可确诊，阴性可能为野生型GIST或其它肿瘤，如desmin检测为阳性则可能为平滑肌瘤；S-100为阳性则考虑神经鞘瘤，如二者阴性应进一步做DOG1免疫组化检测，阳性则可确诊GIST。因此，GIST病理确诊程序繁复，而且GIST转移复发率高，特别是沿活检路径，或手术时瘤体破溃等极易带来种植转移。因此，临床迫切需要高灵敏度的血清检测标志物来突破GIST诊治瓶颈。

近年来，随着对肿瘤发病机理研究的不断深入，发现Cystatin家族作为组织蛋白酶主要是半胱氨酸蛋白酶的内源性抑制剂，在肿瘤的发生、发展、浸润和转移过程中起着非常重要的作用。研究结果显示，Cystatin家族的几个成员在不同肿瘤中的表达水平有所上升，例如Cystatin C在卵巢癌和头颈部癌症中的表达有不同水平的上升，stefin A在非小细胞肺癌中的表达水平有所增加，Cystatin F在多种肿瘤中的表达水平都有显著增加，很可能是由于在肿瘤发生、发展过程中需要组织蛋白酶的参与，先诱导其表达量增加，再激活机体本身的应激机制，导致Cystatin的表达量上升以抑制过盛的组织蛋白酶活性。但Cystatin的表达量并不与肿瘤的发展成正相关关系，例如在胶质瘤中，Cystatin C的低表达意味着疾病的晚期，患者的生存期较短，且易于复发，这可能是到了肿瘤的后期阶段，又会有一些其他的机制对Cystatin的水平进行调控，以促进肿瘤的进一步恶化。半胱氨酸蛋白酶抑制剂SN（Cystatin SN）是人类Cystatin家族成员，由CST1基因编码，含141个氨基酸，分子中有两个二硫键，分子量为16.4Kda，为典型的分泌蛋白，分布于多种体液和分泌物中，如眼泪、唾液、血清、血浆等。文献报道，CST1在胃癌组织中的表达量高于正常胃粘膜组织，在胃癌细胞系中的表达部位与胃癌组织较一致，且表达率随细胞系的分化程度降低而降低；临床资料分析表明，CSTl的表达与浸润深度、远处转移以及TNM分期相关；生存分析表明，CST1表达阳性组的5年生存率显著高于无表达组；Cox回归分析表明，CSTl是一个独立预后因子；从而提示CST1可能在胃癌的发生、发展过程中发挥类似肿瘤抑制因子的作用。