[发明专利]一种一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域中制备酚纳米制剂的方法，具体涉及制备一种可示踪的携载棉酚的纳米粒子作为荧光探针及药物传输工具的方法。

背景技术

棉酚亦称棉子酚，是从棉籽中分离的一种酚类成分，其化学结构由Adams等于1938年阐明，为2.2′联二萘-8,8′二羟基醛-1,1′，6.6′7.7′六羟基-5,5′二异丙基-3-3′二甲基，分子量518.54，为有毒的黄色色素，存在于锦葵科植物草棉、树棉或陆地棉成熟种子、根皮中。棉酚有两种光学异构体，先从棉簇植物中分离出消旋体，然后从桐棉植物中分离出右旋体，再从海岛棉提出左旋体。具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤及抗生育作用。

经过近40年的努力，对棉酚抗肿瘤的探索无论在实验室研究还是临床试用方面，都取得令人鼓舞的进展。据报道,棉酚对起源于淋巴及粒细胞、肾上腺、乳腺、宫颈、直肠和中枢神经系统的多种肿瘤细胞株均有明显的抑制作用。其抗肿瘤机理为：一、它通过抑制拓扑异构酶Ⅱ的催化激活和干预拓扑异构酶-DNA复合物形成的稳定性，影响细胞的功能。棉酚降低DNA聚合酶α和β的活性，抑制DNA合成，导致细胞在S期中止，是一种特异的DNA合成抑制剂，在较大剂量下抑制细胞分裂，从而抑制细胞生长。二、棉酚对肿瘤细胞系PC3的转化生长因子TGF-β1的表达有刺激作用。作用于TGF-β1基因的表达，抑制细胞DNA合成和中止细胞于G0/Gl期。三、棉酚干预蛋白激酶的功能，调控信号传导通路，调节细胞的增殖和分化，阻止肿瘤的发生和发展。研究表明，棉酚抑制鸟尿酸脱羧酶激活的PRL刺激的细胞分裂，降低3H-Tdr掺入DNA比例，从而导致DNA合成的下降和细胞分裂的抑制。四、棉酚能抑制细胞能量代谢，通过乳酸脱氢酶（LDH）同源酶Ⅴ型抑制线粒体氧化鳞酸化和电子传递，引起线粒体肿胀，嵴断裂、固缩、严重空泡化及溃破等。线粒体是细胞呼吸、能量供应和氧化、磷酸化的重要细胞器，线粒体损伤从而导致细胞死亡。

随着对棉酚抗肿瘤机制进一步全面的认识和实验室研究及临床试用的深入，棉酚可能成为一种颇有前途的抗肿瘤药物。为了使任何治疗性药物分子通过胃肠道输送，进入血液并最终到达体内器官和细胞，所述药物分子必须在肠液的水相中是可溶的。然而,棉酚在水中几乎是不溶的，只溶于一些常用的有机溶剂，如丙酮、乙醇、氯仿和二甲亚砜等。因此，在临床上提高棉酚的水溶性和生物利用度显得十分必要。

目前，大部分关于棉酚的专利是涉及其提取与制备方面的，而只有少部分涉及棉酚纳米制剂的制备方法，如：中国发明专利“一种醋酸棉酚静脉注射脂肪乳剂的制备方法”，申请号：201010164025.7公开了一种以醋酸棉酚为活性成分，油酸乙酯或中链脂肪酸甘油三酸酯为油相，大豆卵磷脂为表面活性剂，无水乙醇或PEG400为助表面活性剂，制备醋酸棉酚静脉注射脂肪乳剂的方法；中国发明专利“棉酚或其类似物的液体制剂及其制备方法和用途”，申请号：200710042230.4公开了一种含有棉酚或其类似物的液体制剂，还公开了所述液体制剂的制备方法和用途；中国发明专利“从棉籽脱酚液中制备高纯度棉酚的方法”，申请号：200810236858.2公开了一种采用脱酚液从棉籽脱酚液中提取高纯度棉酚的方法；中国发明专利“水溶性棉酚制剂及其制备方法”，申请号：95111745.9公开了一种水溶性棉酚的口服液、针剂、散剂、片剂、胶囊等制剂的制备方法。而关于本发明可示踪的载棉酚的纳米制剂的制备工艺还没有类似报道，尤其是棉酚纳米制剂在胃癌治疗方面的专利也还未有相关报道。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明旨在提供一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法，该方法制备出的棉酚纳米制剂具有载药量高，稳定性好，治疗胃癌效果显著的特点。作为荧光探针及药物传输工具在生物医学领域具有广阔的应用前景。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种一锅法制备多功能棉酚纳米制剂的方法，该制备方法包括下列步骤：

（1）选取摩尔比率为1:2～1:26的脂类荧光染料与3-氨丙基三乙氧基硅烷在2ml～12ml的有机溶剂中避光反应12小时，得到脂类荧光染料-3-氨丙基三乙氧基硅烷;

（2）称取4～26mg的棉酚，20ul～300ul的脂类荧光染料-3-氨丙基三乙氧基硅烷，以及8～50mg的聚乙二醇衍生物，混合溶于1～6ml有机溶剂中,并在100HZ下超声作用3～11分钟，获得混合液；