[发明专利]一种地钱总黄酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明属中药制药工程领域，涉及一种地钱总黄酮的制备方法，方法中包括碱水提取、调酸析出、醇溶精制等关键步骤。

背景技术

在苔藓植物世界中，地钱(Marchantia polymorpha L.)是分布最为广泛的物种之一。地钱属苔纲，地钱科，又名地浮萍、一团云，全年均可采收，以全草入药，可用鲜品，亦可用干品。

地钱的化学成分主要有挥发油、黄酮类、萜类、糖类、氨基酸等。从现有文献分析，发明人所在的团队研究最为活跃，对地钱总黄酮的提取、分离和含量测定撰写了1篇博士论文(拳卷地钱中黄酮类化合物的分离纯化、结构表征及生物活性研究，中南大学，2004年)，以及5篇研究性论文(地钱总黄酮提取的研究，林产化学与工业，2004年第6期；拳卷地钱总黄酮的提取与纯化，食品科学，2005年第10期；拳卷地钱中黄酮类化合物的含量测定，中南药学，2005年第2期；反相高效液相色谱法用于地钱中黄酮类化合物的分离与测定，分析试验室，2005年第4期)。现有文献中，从地钱中提取黄酮类物质的方法，无一例外地采用60～80％的乙醇回流提取，并且只达到实验室规模，生产量很小。在中药新产品研发过程中，药理药效研究、制剂试制、长期毒性研究等，需要大量的地钱总黄酮，现有方法显然难以满足。

截至目前，与地钱有关发明专利共有10个，其中涉及化学成分提取(分离)的有3个：一种利用超高压技术制备地钱中金鱼草素的方法(201210595621.X)、地钱提取物的制备工艺及其在制备治疗肝癌和乙型肝炎药物中的应用(200610031324.7)、地钱挥发油及制剂的制法和在制备抗癌药中的应用(200710035277.8)。与本专利申请相近的，为第二个专利(地钱提取物的制备工艺及其在制备治疗肝癌和乙型肝炎药物中的应用，200610031324.7)，但其提取物的制备方法并不明确，根据说明书的描述，可能是用70％的乙醇提取，所得成分主要为黄酮类。

发明内容

本发明的技术方案包括：药材经碱提，酸沉，不溶物用稀醇精制。技术方案中的碱提-酸沉，是利用地钱黄酮类化合物可溶于稀碱水，但不溶于稀酸水的特点而设计的；同样，用稀醇精制，也是利用地钱总黄酮不溶于水，但溶于热稀醇的特点而设计的。

本发明所述的用碱性水加热提取，是指用NaOH、Ca(OH)₂或KOH将水调节至pH9～11，然后用于提取；提取温度范围为50～100℃，提取时间为1～2小时；如提取过程中进行搅动，提取效果更佳。优选用Ca(OH)₂调节水的pH，煮沸1小时，提取2次。

本发明所述的用酸调至酸性，是指趁热用HCl或H₂S0₄将碱提液调节至pH3～5，静置，使冷却至室温；静置时间至少达48小时以上，否则难以过滤。优选用HCl调节pH，静置96小时。

本发明所述的用醇溶液加热溶解，是指用60～85％(v/v)的乙醇或甲醇水溶液，对碱提酸沉所得的不溶物进行加热溶解，醇溶液的用量一般为不溶物的10～30倍(v/w)，加热至沸，回流时间1～2小时。优选用20倍70％乙醇(v/w)回流溶解1小时。

与现有技术相比，本发明突出的实质性特点和显著性进步是：

1.本发明用碱水替代现有技术中的稀醇，从地钱中提取黄酮类物质，安全、环保、成本低。

2.本发明生产工艺及工艺操作简单，易于放大，适于工业化生产。

具体实施方式

下列实施例子用于举例说明本发明，并不是对本发明保护范围的任何限制。

实施例一

先制备提取用的石灰碱性水：将石灰乳与水充分混合，静置96小时，取上清液，然后不断用水稀释，使pH9.5，备用。取鲜地钱1000克，乱刀砍碎，置不锈钢锅中，加入10升pH9.5石灰水，煮沸1小时，趁热倒出提取液，如此提取3次。合并提取液，2层普通滤纸过滤，取滤液，趁热用HCl调pH3.5，静置，同时使料液自然冷却，96小时后过滤，取滤饼，湿重102克，置平底烧瓶中，加入2500毫升75％乙醇水溶液，加热回流1小时，放置，冷至室温后过滤，取滤饼，80℃烘干，得地钱总黄酮20.3克。按文献方法(拳卷地钱中黄酮类化合物的含量测定，中南药学，2005年第2期)，以芦丁为对照，分光光度法测定地钱总黄酮中的黄酮含量为75.82％。

实施例二