[发明专利]无色孔雀石绿单克隆抗体及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物免疫学技术领域，具体地说，涉及无色孔雀石绿单克隆抗体及其制备方法和用途。 

背景技术

孔雀石绿（Malachite Green，MG）化学名为四甲基代二氨基三苯甲烷，分子式为C₂₃H₂₅ClN₂，又名碱性绿、孔雀绿或者中国绿，属三苯甲烷类染料，曾广泛用于治疗和预防水霉病等。然而孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿（Leuco malachite green，LMG）具有致癌、致畸、致突变等副作用，尤其是无色孔雀石绿，其与孔雀石绿相比在水产品中的残留量更多，残留时间更长，国家已明令禁止用于治疗和预防水产动物病害，但目前仍然有不少无良商家暗地添加。因此，建立水产品中无色孔雀石绿的快速检测技术已刻不容缓，对于维护消费者的权益和保障其生命健康具有重要意义。 

孔雀石绿的常规检测方法主要包括薄层色谱法（TLC）、分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）、以及免疫学方法如酶联免疫分析法、酶联免疫检测试剂盒等。薄层色谱法（TLC）、分光光度法、高效液相色谱法（HPLC）虽然灵敏度高，能够进行大规模检测，但是检测所花费的时间长，购买仪器的费用也非常的高，一般每台检测仪在30万元以上，成本极高。而酶联免疫竞争法（ELISA）具有灵敏度高、操作简单、成本低、检测速度快等优点，因此利用酶联免疫竞争法建立灵敏度高、操作简单、能快速检测水产品中孔雀石绿的试剂盒有着十分广泛的应用前景。而制备试剂盒的前提则是成功地获得针对孔雀石绿和无色孔雀石绿的单克隆抗体。 

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种无色孔雀石绿单克隆抗体。 

本发明的再一的目的是，提供一种杂交瘤细胞株。 

本发明的另一的目的是，提供一种细胞培养物。 

本发明的第四个目的是，提供一种组合物。 

本发明的第五个目的是，提供一种检测条或检测试剂盒。 

本发明的第六个目的是，提供一种无色孔雀石绿单克隆抗体的制备方法。 

本发明的第七个目的是，提供一种如上所述的无色孔雀石绿单克隆抗体的用途。 

本发明的第八个目的是，提供一种检测生物学样品中无色孔雀石绿存在或浓度的方法。 

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种无色孔雀石绿单克隆抗体，所述的单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO：C2012170的杂交瘤细胞株产生。 

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：保藏号为CCTCC NO：C2012170的杂交瘤细胞株。 

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：一种细胞培养物，所述的细胞培养物含有如上所述的杂交瘤细胞株。 

为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：一种组合物，所述的组合物含有如上所述的无色孔雀石绿单克隆抗体。 

为实现上述第五个目的，本发明采取的技术方案是：一种检测条或检测试剂盒，所述的检测条或检测试剂盒含有如上所述的无色孔雀石绿单克隆抗体。 

为实现上述第六个目的，本发明采取的技术方案是：一种无色孔雀石绿单克隆抗体的制备方法，所述的方法包括：(1)培养杂交瘤细胞株CCTCC NO：C2012170，使之分泌单克隆抗体；(2)分离步骤(1)获得的单克隆抗体。 

为实现上述第七个目的，本发明采取的技术方案是：如上所述的无色孔雀石绿单克隆抗体在检测水产品中无色孔雀石绿残留量中的用途。 

为实现上述第八个目的，本发明采取的技术方案是：一种检测生物学样品中无色孔雀石绿存在或浓度的方法，所述的方法包括使所述的样品与如上所述的单克隆抗体、如上所述的细胞培养物、或如上所述的组合物接触的步骤。 

需要说明是的是： 

本文所用的术语“单克隆抗体”是指获自基本上同源的抗体群的抗体，即，组成该群体的抗体个体都相同，除了可能存在少量可能的自发突变。因此，修饰语“单克隆”是指该抗体的性质不是离散抗体的混合物。