[发明专利]草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物免疫学技术领域，具体地说，涉及草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体及其制备方法和用途。

背景技术

草鱼（Ctenopharyngodon idellus）是一种草食性鱼类，饲养成本低，养殖地域广，是我国淡水养鱼的主要品种，其产量约占淡水养殖总产量的20％。但草鱼病害多，而其中以草鱼出血病最甚，给淡水养殖业带来巨大的损失。免疫预防是草鱼出血病最有效的防治方法之一，因此疫苗研制对该病的防治意义重大。但对于疫苗的免疫效果的评价往往需要进行免疫攻毒实验，耗时长，且缺乏评价标准。而以鱼类的免疫球蛋白（Ig）单克隆抗体为基础，通过分析被接种疫苗的鱼类血液、免疫器官和组织中抗体水平变化规律来评价疫苗免疫效果的方法，为建立草鱼疫苗免疫效果的评价标准体系提供了有力的工具。因此对草鱼Ig的研究有助于深入了解草鱼体液免疫应答规律，并能帮助建立草鱼Ig分析与检测方法，继而建立以草鱼Ig水平为基础评价疫苗免疫效果的方法，大大推动草鱼免疫诊断与免疫疫苗等免疫学防治措施的发展。而目前关于草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体。

本发明的再一的目的是，提供一种杂交瘤细胞株。

本发明的另一的目的是，提供一种细胞培养物。

本发明的第四的目的是，提供一种组合物。

本发明的第五的目的是，提供一种检测条或检测试剂盒。

本发明的第六的目的是，提供一种草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体的制备方法。

本发明的第七的目的是，提供一种草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体的用途。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体，所述的单克隆抗体由保藏号为CCTCC NO：C2012168的杂交瘤细胞株产生。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：保藏号为CCTCC NO：C2012168的杂交瘤细胞株。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：一种细胞培养物，所述的细胞培养物含有如上所述的杂交瘤细胞株。

为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：一种组合物，所述的组合物含有如上所述的草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体。

为实现上述第五个目的，本发明采取的技术方案是：一种检测条或检测试剂盒，所述的检测条或检测试剂盒含有如上所述的草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体。

为实现上述第六个目的，本发明采取的技术方案是：一种草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体的制备方法，所述的方法包括：(1)培养杂交瘤细胞株CCTCC NO：C2012168，使之分泌单克隆抗体；(2)分离步骤(1)获得的单克隆抗体。

为实现上述第七个目的，本发明采取的技术方案是：如上所述的草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体在制备检测草鱼Ig水平的试剂中的用途；如上所述的草鱼免疫球蛋白的单克隆抗体在制备评价草鱼疫苗的免疫效果的试剂中的用途。

需要说明是的是：

本文所用的术语“单克隆抗体”是指获自基本上同源的抗体群的抗体，即，组成该群体的抗体个体都相同，除了可能存在少量可能的自发突变。因此，修饰语“单克隆”是指该抗体的性质不是离散抗体的混合物。

本发明的检测条或检测试剂盒可采用本领域常用的检测板或检测试剂盒材料，采用常规的检测板或试剂盒制备方法制成。例如，本发明的检测条，可包括测试条和支撑测试条的支撑板，如可采用PVC聚酯胶板等；所述的测试条由滤样纸、层析材料、硝酸纤维素膜和吸水纸依次搭接组成，搭接部可以采用常规的方法，如胶带等固定连接；其中：层析材料预包被带有有色标记或其他可观测标记（例如胶体金标记）的本发明的单克隆抗体。硝酸纤维素膜上吸附检测线或质控线；所述的检测线为本发明的单克隆抗体，检测线所在的区域为检测区；所述的质控线为羊抗鼠多克隆抗体，质控线所在的区域为质控区。因此，测试条上的检测物依次为：预包被的单克隆抗体、检测线和质控线。可根据多种检测原理和方法，按照需要在试剂盒中配备检测所需的试剂或试剂组。此外，本发明的试剂盒还可根据需要包括：容器、对照物（包括阳性或阴性对照）、使用说明书、缓冲剂、免疫助剂等，本领域技术人员可根据具体情况对其进行选择。