[发明专利]一种萜类化合物的用途

说明书

发明内容

本发明涉及一种萜类化合物的用途。具体涉及益母草中紫罗烷类化合物的用途及其提取纯化方法。

背景技术

益母草始载于《神农本草经》，原名茺蔚，被列为上品。在《本草纲目》中被称之为“血家之圣药”，主治“胎漏难产，胎衣不下，血晕，血风，血痛，崩中漏下，尿血”，为妇科经产要药。

益母草中主要含有生物碱、二萜、黄酮、环烯醚萜苷、苯丙醇苷、挥发油、肽类和脂肪酸类等成分,目前活性研究较多的主要是生物碱和二萜类：

（1）生物碱：主要包括水苏碱、益母草碱、益母草啶和益母草宁等。现代研究表明益母草总生物碱对脑缺血再灌注损伤有治疗作用，其中，益母草碱不仅可通过抗氧化作用保护缺血损伤的心肌细胞，还具有神经保护活性。

（2）二萜：近年来对其活性成分研究增多，其中Leoheteronin A和Leopersin G明显抑制乙酰胆碱酯酶活性，在治疗阿尔茨海默病方面有很好的前景；prehispanolone为一种血小板拮抗因子，可抑制血小板聚集；leojaponin对谷氨酸盐损伤的大脑皮层细胞有保护作用；Khan得到的半日花烷型二萜具有抗炎作用等。

随着人们对益母草认识的加深和现代科学技术的进步，益母草药效部位和活性成分的研究迅速开展，但是针对益母草倍半萜的研究还很少。而且抗凝血成分可能与益母草的传统功效“活血”相关，但有关抗凝血成分的研究仍然十分缺乏。由此可见，从益母草中获得抗凝血成分具有很好的前景和研究价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种萜类化合物的新用途；本发明还提供了该类萜类化合物的制备方法。

本发明提供了如下所示的萜类化合物在制备抗凝血药物中的用途，其结构式如下：

式I

其中，R₁为H、C1-5的直链烷基、糖基或其中，R₂选自C1-4的直链烷基。

进一步地，所述药物是抗血小板聚集药物。

更进一步地，所述药物是抗血栓的药物。目前，抗凝血药物多用于防治血栓形成的疾病。

进一步地，所述化合物结构式如下：

式Ⅱ。

进一步地，所述化合物为2-羟基-2,6,10,10-四甲基-1-氧杂螺[4.5]葵-6-烯-8-酮。

优选地，所述化合物为(2S,5S)-2-羟基-2,6,10,10-四甲基-1-氧杂螺[4.5]葵-6-烯-8-酮。

本发明还提供了上述（2S,5S)-2-羟基-2,6,10,10-四甲基-1-氧杂螺[4.5]葵-6-烯-8-酮的提取纯化方法，它包括如下操作步骤：

（1）称取益母草药材，粉碎，加95%v/v乙醇提取，提取液减压回收溶剂后，得到乙醇浸膏；

（2）将乙醇浸膏用水分散，用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯部分，减压回收溶剂，得乙酸乙酯浸膏；

（3）采用硅胶柱色谱对乙酸乙酯浸膏进行分离，石油醚：丙酮=(100:1)～(0:1)梯度洗脱，取石油醚-丙酮=10:1洗脱部分上反相聚苯乙烯型树脂柱，30-100%v/v甲醇水溶液梯度洗脱，收集50%甲醇洗脱部分，再上凝胶柱色谱，石油醚-氯仿-甲醇=5:5:1洗脱，薄层追踪，收集含有目标化合物的洗脱液，回收溶剂，剩余物再先后经制备薄层色谱、反相液相制备色谱分离，纯化即得。

其中，制备薄层色谱的展开剂为分离石油醚-丙酮=8:1，反相液相制备色谱的流动相为75%v/v甲醇水溶液。

其余糖苷类、醚类、酯类化合物，均可用2-羟基-2,6,10,10-四甲基-1-氧杂螺[4.5]葵-6-烯-8-酮为原料，采用常规合成方法制备即可。

本发明从益母草中首次分离得到的紫罗烷类倍半萜化合物，在体外可以明显抑制血小板聚集，且对凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）和凝血酶时间（TT）有延长趋势，具有一定的抗凝血活性，为抗血栓天然药物的开发提供了新的选择。

附图说明

图1化合物1的ESI-MS图

图2化合物1的¹H-NMR图

图3化合物1的¹³C-NMR图

图4化合物1对体外ADP诱导血小板聚集的抑制作用图

图5化合物1对凝血功能的影响结果图

具体实施方式

实施例1(2S,5S)-2-羟基-2,6,10,10-四甲基-1-氧杂螺[4.5]葵-6-烯-8-酮（化合物1）的提取、分离纯化和结构鉴定