[发明专利]一种二乙酰氨乙酸乙二胺的有关物质及其检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种二乙酰氨乙酸乙二胺的有关物质及其检测方法，属于药学技术领域，更具体的，涉及一种二乙酰氨乙酸乙二胺原料及其制剂的有关物质的测定方法。 

背景技术

目前我国每年需止血治疗的病人总数大约有2000多万人，主要集中在手术科室以及部分内科科室，在多种止血方法中，止血药使用最为广泛。止血药主要是通过收缩小动脉及毛细血管，或增强血小板功能，或加速加强血液凝固过程，或抑制血块溶解过程而产生止血作用。 

二乙酰氨乙酸乙二胺 

化学名称：二乙酰氨乙酸乙二胺盐

化学结构式： 

分子式:C₁₀H₂₂N₄O₆

分子量:294.31

本品为我国自行合成的新型止血药，本品可（1）抑制纤溶酶原激活物，使纤溶酶原不能激活为纤溶酶，从而抑制纤维蛋白的溶解，产生止血作用。（2）促进血小板释放活性物质，增强血小板的聚集性和粘附性，缩短凝血时间，产生止血作用。（3）增强毛细血管的抵抗力，降低毛细血管的通透性，从而减少出血。

市场上现存含有二乙酰氨乙酸乙二胺的药物制剂产品主要有冻干粉针、小容量注射液、大容量注射液，适用于预防和治疗各种原因出血，对手术渗血、外科出血、呼吸道出血、五官出血、妇科出血、痔出血、泌尿道出血、癌出血、消化道出血、颅脑出血等均有较好疗效，被视为全科止血药，在临床使用中具有不可替代的作用。 

目前二乙酰氨乙酸乙二胺的合成工艺普遍采用甘氨酸与乙酸酐反应制得，该路线合成过程中会产生诸多工艺杂质（即“有关物质”），有关物质的存在会引起药物不良反应，存在安全隐患，需严格控制。某些有关物质在结构上与二乙酰氨乙酸乙二胺极性相近，色谱行为也极为相似，不易完全分离。在现有的二乙酰氨乙酸乙二胺高效液相色谱检测分析方法中，多数采用了一定比例的有机溶剂缓冲盐溶液，且流速均为1.0ml/min，造成二乙酰氨乙酸乙二胺在色谱柱中保留时间较短，使相邻的色谱峰难以得到有效分离，有关物质峰混入二乙酰氨乙酸乙二胺主成分色谱峰中，丢失了有关物质的信息，得到了错误的分析结果。 

并且，现有的检测分析方法都是采用了主成分自身对照的方法，该方法适用于无法获得对照品，且杂质与主成分在同一波长下吸收响应因子接近时方可实现较为准确的定量，现有的液相色谱分析方法都忽略了各杂质成分响应因子的问题，千篇一律的采用不加校正因子的主成分自身对照法，存在一定的局限性，无法对有关物质进行准确的定量测定，无法科学的对二乙酰氨乙酸乙二胺原料药及其药物制剂进行质量控制。 

本发明人经过大量系统的创造性研究工作，明确了二乙酰氨乙酸乙二胺合成过程产生的一种有关物质的化学结构，制备了有关物质的对照品，利用高效液相色谱法，采用外标法建立了该有关物质的质量控制方法，用该方法评价准确度高，创造性的解决了现有技术问题，与现有技术相比具有实质性的不同和显著的进步，迄今未见国内外有相关报道和使用。 

发明内容

本发明第一个目的是明确二乙酰氨乙酸乙二胺原料药及其药物制剂中的一种有关物质的结构，并克服现有技术的缺点和不足，提供一种高准确度的有关物质检测方法，利于全面客观评价二乙酰氨乙酸乙二胺原料药及其药物制剂的质量，保证人体用药安全。 

本发明的第二个目的是提供一种N-乙酰基甘氨酰甘氨酸制备方法，样品纯度高于99%，可作为对照品使用，便于二乙酰氨乙酸乙二胺原料药及其药物制剂在生产时进行中间控制和工艺优化研究，全面提升产品质量。 

本发明的第三个目的是提供一种流动相中不含有机溶剂的高效液相色谱检测方法，利于劳动保护和保护环境。 

本发明提供了一种二乙酰氨乙酸乙二胺的有关物质，该化合物为N-乙酰基甘氨酰甘氨酸，结构式如下： 

 其特征在于，该化合物的检测方法操作步骤包括：

（1）精密称取N-乙酰甘氨酰甘氨酸对照品适量，加水制成每1ml约含N-乙酰甘氨酰甘氨酸2.5μg的溶液，作为对照品溶液；

（2）精密称取二乙酰氨乙酸乙二胺原料药或含有二乙酰氨乙酸乙二胺的药物制剂样品适量，加水制成每1ml约含二乙酰氨乙酸乙二胺0.5mg的溶液，作为供试品溶液；

（3）分别精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。

所述的N-乙酰甘氨酰甘氨酸的检测方法，其特征在于，色谱条件为： 

（1）色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；