[发明专利]一种黄绿蜜环菌的深层发酵及其应用

说明书

技术领域

本发明属于食品及生物医药技术领域，尤其涉及一种黄绿蜜环菌的深层发酵方法。

背景技术

黄绿蜜环菌(Armillarialuteovirens)，是一种名贵的野生食用菌，资源量非常有限，目前尚未人工驯化，仍处于野生状态。主要分布于青海、西藏、四川、甘肃，其海拔分布范围约为3000-4300m，其中以祁连的黄蘑菇最为质优。黄绿蜜环菌鲜味独特，口感极佳，颇受世人欢迎。它含有丰富的蛋白质、矿质元素、氨基酸和多种维生素，并含有能够增强机体免疫功能和抑制肿瘤生长等生理活性的化学成分，具有较高的营养价值和食疗保健作用。

黄绿蜜环菌集食用、药用和保健功能于一身，迫切需要对黄绿蜜环菌进行有效的开发利用。为了克服黄绿蜜环菌野生资源短缺的现状，进行菌种的深层发酵，实现菌丝体的工业化生产成为必选之路。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供优良的黄绿蜜环菌发酵菌种和一种工艺简单，生产成本低廉、无污染、适合企业化生产的高效黄绿蜜环菌发酵生产工艺。

本发明实施例是这样实现的，一种黄绿蜜环菌的深层发酵方法，所述黄绿蜜环菌的深层发酵方法包括以下步骤：

采集野生黄绿蜜环菌子实体，分离纯化菌种；

纯化的黄绿蜜环菌菌种进行优良菌种筛选；

筛选的优良菌种进行驯化培养；

驯化的黄绿蜜环菌菌种进行深层发酵生产；

从发酵液收集黄绿蜜环菌菌丝体。

进一步、所述采集野生黄绿蜜环菌子实体，分离纯化菌种的具体步骤为：将新鲜子实体菌柄根部泥土剔除，装入无菌牛皮纸袋中，每袋装1个；在无菌条件下，从菌褶和菌柄结合部位用组织分离法或孢子分离法分离黄绿蜜环菌菌种，用PDA培养基培养；对分离的菌种进行转接、纯化。

进一步、所述纯化的黄绿蜜环菌菌种进行优良菌种筛选的具体步骤为：对纯化的菌种进行形态、生理生化特征检测，筛选出优良的目标菌株。

进一步、所述筛选的优良菌种进行驯化培养的具体步骤为：对优良菌株进行多种碳源、氮源、C/N、无机盐、维生素的培养基组方和培养条件筛选、人工驯化，优选出最佳培养基组方：10～30％马铃薯浸提液、10～30％豆芽浸提液、5～10％葡萄糖、1～5‰KH₂P0₄、1～5‰MgSO₄、0.1～1‰微量盐、0.1～1mg/L VB₁、0.1～1mg/L VB₂、pH5.5～7.5，20～30℃培养。

进一步、所述驯化的黄绿蜜环菌菌种进行深层发酵生产的具体步骤为：对驯化菌种进行深层发酵，优选出发酵培养基组方：10～30％马铃薯浸提液、10～30％黄豆芽浸提液、0.1～1mg/L复合VB、pH5.5～7.5。发酵条件：5～30％接种量、50～250mL/500mL摇瓶装量、20～30℃摇床温度、50～250rpm摇床转速、7～20d发酵周期。

进一步、所述从发酵液收集黄绿蜜环菌菌丝体的具体步骤为：对黄绿蜜环菌发酵液进行离心，离心速度为1000～3000rpm，时间为5～20min，得到沉淀部分菌丝体；菌丝体用纯净水洗3～7次，真空冷冻干燥，温度为40～60℃。

本发明的另一目的在于提供一种上述的深层发酵方法制备的黄绿蜜环菌在饮料、口服液、调味品、特殊膳食食品、保健药膳中的应用。

本发明通过菌种分离纯化、优良菌种筛选、菌种驯化研究，对优良的驯化菌种进行菌丝体深层发酵工艺研究，以期遴选出一种合理、可行的黄绿蜜环菌菌丝体生产工艺。从采自不同地区的黄绿蜜环菌子实体中，通过菌种分离、形态培养、生理生化特征及菌丝体有效成分等研究，表明菌丝体含有丰富多糖及18种氨基酸，低脂高蛋白，还含有VC、VB₁、VB₂、VE，钾、钠、钙、铁、锌、锰、铜等17种矿质元素。以菌落形态特征、生长速度、目标产物为评价指标，获得了优良菌株AM-H。通过单因素实验和正交实验，以菌丝体得率为评价指标，筛选出成本低廉，工艺简单的黄绿蜜环菌菌丝体粉生产工艺，为黄绿蜜环菌菌丝体的规模化生产提供了基础资料，也为黄绿蜜环菌的进一步开发应用奠定基础。

附图说明

图1是本发明实施例提供的黄绿蜜环菌的深层发酵方法的流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。