[发明专利]双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及牙膏中氯化两面针碱含量的测定方法，属于高效液相色谱法测定物质含量的技术领域。

背景技术

随着食品安全事件引起社会广泛关注，部分学者和社会舆论将视角延伸到“入口形”日化用品领域中，而牙膏作为口腔清洁用品是这一类产品的典型代表，关系到人身安全。对于功能性牙膏的质量与安全监督不可松懈。我国在中草药功效方面的研究有着辉煌悠久的历史，中草药功效型牙膏从面试至今已有几十年的历史，已经成为国内牙膏市场中的主类产品，一些国际日化用品企业为了加入中国市场也纷纷对中草药功效型牙膏进行开发和生产。这其中不免出现真假难辨、鱼目混珠的现象。

氯化两面针碱为芸香科花椒属植物两面针Zanthoxylum nitidum(Roxb.) DC 的干燥根两面针中的苯并菲定类生物碱，英文名称：Nitidine chloride ，分子式：C₂₁H₁₈NO₄·Cl  ，CAS号：13063-04-2 ，分子量：382.82 ，标准品为淡黄色针状结晶，溶于甲醇等有机试剂。氯化两面针碱是两面针的主要活性有效成分，具有抗炎、镇痛、解毒等作用。

近年来，两面针药材资源开始出现匮乏，出现了较多根茎混用现象或伪品，如常见的飞龙掌血属的飞龙掌血Toddalia asiatica Lam 等，影响药材质量，随之影响了牙膏中所添加的两面针活性成分的质量。中国药典以氯化两面针碱为两面针含量测定的指标进行检测。

牙膏基质为复杂的混合物，通常由摩 擦剂、保湿剂、表面活性剂、增稠剂、甜味剂、色素、香精和活性添加物等组成。某些添加成分的化合物碳链比较长，在前处理中难以去除，同时，也对色谱柱的柱效有影响。用传统的高效液相色谱方法去分离、检测，其中的杂质对标准品氯化两面针碱的测定有干扰。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，本发明方法操作简单，快速，选择性好，重现性好；能够使目标分析物的色谱峰与杂质色谱峰达到较好的基线分离，可以排除牙膏基质中干扰物的干扰，准确地对牙膏中的氯化两面针碱进行定量分析，且分离效果好，线性范围宽。

本发明所采取的技术方案是：一种双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，包括以下步骤：（1）绘制氯化两面针碱的标准曲线图；

（2）准确称取待测牙膏放置于具塞离心管中，加入甲醇振荡、摇匀，用甲醇定容；

（3）将步骤（1）的具塞离心管室温下超声处理，离心，取上清液用0.22μm的有机相滤膜过滤得待测溶液；

（4）利用双三元高效液相色谱法二维柱分离，紫外检测器测定待测溶液中氯化两面针碱，根据步骤（1）的标准曲线得出牙膏待测溶液中氯化两面针碱的含量；

采用C₁₈二维色谱柱测定；

第一维色谱柱为富集柱C₁₈柱（2.1mm×100mm，5μm），第二维色谱柱为分析柱C₁₈柱（4.6mm×250mm，5μm）。

所述步骤（4）中采用C₁₈二维色谱柱测定的优选条件为：以乙腈和0.02mol/L KH₂PO₄溶液为流动相，流动相加H₃PO₄调节pH值为2.61～2.75，检测波长为328nm，进样量为50uL，色谱柱柱温为40℃，等梯度洗脱，乙腈与KH₂PO₄溶液的体积比是35:65，流速为0.5～1.2mL/min；

十通阀的切换优选时间如下：