[发明专利]五溴联苯醚-121的半抗原、人工抗原及抗体

说明书

技术领域

本发明涉及五溴联苯醚-121的半抗原、人工抗原及抗体，属于免疫化学分析技术领域。

背景技术

多溴联苯醚（polybrominated diphenyl ethers，简称PBDEs)是一类具有联苯醚结构的多卤代芳香族化合物。作为一类重要的溴代阻燃剂，其被广泛应用于电子电气设备、塑料制品和纺织品等，含量从5%到30%不等。其商业性生产开始于20世纪70年代，主要有4种工业品：四溴联苯醚(Tetra-BDE)、五溴联苯醚、八溴联苯醚和十溴联苯醚，它们实际上都是多种PBDE同类物的混合物。PBDEs作为添加型阻燃剂，是以物理方式结合在树脂基材上的，因此在生产、使用和处置过程中易被释放到环境中。1979年在美国PBDEs生产厂周边环境中采集的土壤和污泥样品中检测到了十溴联苯醚(BDE-209)的存在(Alaee M,et al.Chemosphere,2002,46:579-582)。1987年Jansson等证明了波罗的海、北海、北冰洋的鸟(以鱼为食)和海洋哺乳动物的组织样品中有PBDEs存在，首次提出PBDEs是全球性的污染物质(Jansson B,et al.Chemosphere,1987,16:2343-2349)。近年来PBDEs由于其在全球环境和生物体内的普遍存在而备受关注。大量的环境监测数据表明当前环境中普遍存在着PBDEs，包括大气、水、沉积物、土壤、污泥以及各种生物样品，分布范围几乎遍及全球，而且浓度迅速增长。

多溴联苯醚的化学结构与多氯联苯(polychlorinated biphenyls，PCBs)、多溴联苯(polybrominated biphenyls，PBBs)相似，因此被认为具有与它们类似的特性，如强亲脂性、半挥发性和生物蓄积性等(Hardy M L.,Chemosphere,2002,46:717-728)。一些研究表明，PBDEs具有潜在的致癌作用，并对神经、内分泌和免疫系统有毒害作用(Mcdonald T A.,Chemosphere,2002,46:745-755)。另外，PBDEs在高温焚烧时可能会生成毒性更强的多溴代二苯并呋喃(PBDFs)和多溴代二苯并二噁英(PBDDs)(Buser H R.,Environ.Sci.&Technol.,1986,20:404-408)。因此，PBDEs对人类和生态环境的潜在风险成为人们关注的热点。

基于此，开展相应的多溴联苯醚分析检测具有非常重要的现实意义。而目前对多溴联苯醚的检测大多依赖气相色谱法(GC)、液相色谱(HPLC)或者气相质谱连用(GC-MS)等常规手段。众所周知，HPLC或GC的使用通常会受到待测物的蒸气压、热稳定性以及发色团等理化性质的限制，不适用于难气化或难分离的有害物的分析。而且这些方法操作过于繁琐，同时需要对样品进行复杂的预处理。和其他的传统检测方法相比，酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，简称ELISA)是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的检测分析技术。该法具有特异性强、敏感性好、仪器化程度和分析成本低、样品前处理及操作简便、检测时间短、样品容量大等优点，不仅适合高极性和离子型物质的分析，而且便于实现现场的监控和大规模样本的快速筛选。

当今已有对四溴联苯醚PBDE-47的酶联免疫分析，而五溴联苯醚的免疫分析尚无报道。PBDE-121是五溴联苯醚中一类，因此开展其分析检测很有必要。

发明内容

本发明针对现有技术中尚无五溴联苯醚的免疫化学分析技术，目的在于提供一种五溴联苯醚半抗原，该半抗原能与载体蛋白结合得到五溴联苯醚人工抗原，并且能再进一步获得具有特异性识别五溴联苯醚-121的多克隆抗体。

本发明的另一个目的在于提供了一种由上述半抗原制备而来的人工抗原。

本发明还有一个目的是在于提供一种能特异性识别五溴联苯醚-121的多克隆抗体，该多克隆抗体效价高，用于五溴联苯醚-121的分析检测中检测下限低，回收率高，可以广泛应用。

本发明提供了一种五溴联苯醚-121半抗原，该半抗原具有式Ⅰ结构：

式Ⅰ

其中，n为0～8的整数。

优选的五溴联苯醚-121半抗原具有式Ia或式Ib结构：

式Ia

式Ib

本发明还提供了一种五溴联苯醚-121人工抗原，该人工抗原具有式Ⅱ结构：

式Ⅱ