[发明专利]大枣叶提取物及其在制备防治肝损伤药物及保健食品中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物提取物的提取技术及其应用，具体涉及大枣叶提取物的提取技术及其在制备防治肝损伤药物或保健品中的应用。

背景技术

肝脏是机体最重要的脏器之一，肝脏疾病是临床上较为常见的疾病。因此，肝脏疾病一直是医学科学重点研究的对象之一。肝损伤是多种肝脏疾病共有的一种特点突出的病理状态，严重威胁着人类健康。各种有害因素诸如药物、病毒、酒精、生物等可能致使肝功能有不同程度的损害，从而使肝脏的解毒、排泄功能及贮备和再生能力降低，肝血流量减少，代谢负荷加重，从而发生内环境紊乱，肝细胞坏死和凋亡，进而造成肝损伤。全世界有数十亿人曾经或正忍受着肝损伤的痛苦。肝损伤的长期存在往往会导致肝纤维化，是进而诱发肝硬化、肝功能衰竭、甚至肝癌的重要始动因素。因此预防和治疗肝细胞损伤是临床上肝病治疗的重要环节之一，是抑制肝纤维化、肝坏死、肝硬化以及肝癌等疾病发生和发展的基础。因此研究肝损伤防治药物具有重要临床意义。目前临床常用的保肝药物，或因为价格昂贵，或因使用不便，或具有较大副作用，使用受到限制。因此，进一步寻找用于预防和治疗肝损伤的有效药物仍然是当今药理学工作者的努力方向。

大枣叶系鼠李科枣属植物枣（Ziziphus jujuba Mill.）的干燥叶。本草大枣叶作为药用可用于治疗小儿发热、疮疖、热疿、烂脚、烫火伤等症。关于大枣叶的现代研究较少，除少量作为茶饮原料开发应用外，较少被利用，多作为废弃资源丢弃。目前尚未见以大枣叶为原料制备活性提取物的技术，也未见以大枣叶为主要组成组分应用于防治肝损伤的药品或保健食品的报道。

发明内容

发明目的：本发明的目的是为了克服现有技术的不足，在大枣叶原有用途的基础上，开发其新的临床用途，提供大枣叶在防治肝损伤中的应用，实验结果表明，其具有很好的防治肝损伤的作用。本发明的另一个目的在于公开一种大枣叶提取物的制备方法。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种大枣叶提取物，它是通过以下步骤制备得到：

(1)取大枣叶拣选、洗净、干燥后放入提取罐中，加6～12倍量的50%～95%乙醇，加热回流1～3次，过滤、合并提取液，浓缩至无醇味后，得大枣叶的醇提物备用；

(2)取步骤(1)得到的大枣叶醇提物，加1～5倍量水，上大孔树脂柱，先分别用水和浓度为10%乙醇洗脱，再用浓度为60%～95%的乙醇洗脱，收集60%～95%乙醇洗脱液、浓缩、减压干燥得到大枣叶活性部位粗提物，备用；

(3)取步骤(2)得到的大枣叶活性部位粗提物干法上聚酰胺柱，先分别用水和20%乙醇洗脱，再用浓度为70%～95%乙醇洗脱，并收集70%～95%乙醇洗脱液，浓缩，经减压干燥得到大枣叶活性部位精制提取物；

(4)取步骤(3)得到大枣叶活性部位提取物采用制备液相进一步富集得到精制大枣提取物，经检测，总三萜和总黄酮含量>80%。

作为优选方案，以上所述的大枣叶提取物，步骤(1)中提取条件为加10倍量浓度为80%的乙醇，加热到80℃持续回流2小时。该方法可保证提取溶液和药材之间达到足够大的浓度差，增加目标成分的溶出率，因为乙醇浓度太低，大枣叶中的三萜酸类活性成分得率太低，乙醇浓度太高大枣叶中的黄酮苷类成分转移率太低，且脂肪酸、叶绿素等杂质转移率增加。因此本发明根据活性成分的性质，确定乙醇的浓度和用量，得到的提取物目标成分溶出率高，活性更强。

作为优选方案，以上所述的大枣叶提取物，步骤(2)中所述的大孔吸附树脂为非极性大孔吸附树脂。作为更优选方案，其中步骤(2)中所述的非极性大孔吸附树脂为D101型大孔吸附树脂，收集浓度为90%乙醇洗脱液；步骤(3)中收集浓度为90%乙醇洗脱液。本发明以现代提取分离手段和药理活性筛选相结合的方法确定大枣叶最佳防治肝损伤活性提取物，经大量实验研究表明，通过非极性大孔吸附耦合聚酰胺柱色谱，采用不同浓度的乙醇洗脱，有利于大枣叶中的黄酮类和三萜类活性成分的富集，除去糖类、鞣质、叶绿素等杂质，得到高活性成分比例及活性更强的防治肝损伤活性提取物，经HPLC-ELSD及HPLC-DAD检测该活性部位中三萜酸类和黄酮类成分部含量可达70%。

作为优选方案，以上所述的大枣叶提取物，步骤(3)中所述的聚酰胺树脂的粒径为60-80目。