[发明专利]一种务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G及其编码序列的基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及分子遗传学领域，尤其是一种务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G及及编码序列的基因与应用。 

背景技术

任何包含一个未成对电子的原子或原子团，均称之为自由基。能够有效清除来自于生存环境或者自身代谢产物的有毒活性物质对所有的生物机体来说都非常重要。对有氧呼吸生物来说，自由基特别是活性氧自由基如超氧阴离子自由基、过氧化氢自由基等的形成是需氧呼吸代谢过程中不可避免的副产物，正常生理状况下线粒体完成有氧呼吸的过程中，会有1-2%的氧气转化为超氧阴离子自由基，并由此产生一系列破坏性极强的氧化自由基如羟基自由基，通过脂质过氧化、蛋白质变性或者对遗传物质DNA的损伤对细胞或组织造成严重破坏。 

目前发现，活性氧自由基与多种人类疾病有关，如癌症、心脑血管疾病、缺血再灌注损伤、类风湿性关节炎、糖尿病、阿尔茨海默病、帕金森病和衰老等。抗氧物目前在国内外应用广泛, 需求量逐渐增多, 现在被用于预防治疗多种疾病, 如心血管疾病、肿瘤、关节炎、肾功能损伤、糖尿病、自身免疫性疾病等。此外，抗氧化物近年在化妆品领域的应用兴起,尤其是天然抗氧化物。由于皮肤的光老化作用是由于紫外线诱导皮肤细胞产生大量的氧自由基堆积而造成的。现在许多护肤品中加入抗氧化剂, 有减少雀斑、防辐射、延缓衰老、调节免疫和提高皮肤自我保护的作用。 

为了抵抗活性氧自由基对机体的损害，在漫长的进化过程中生物体形成多种不同的自由基清除系统，包括非基因编码的小分子物质，如尿酸、维生素C、维生素E、胡萝卜烯类、硫辛酸和辅酶Q等；基因编码的大分子抗氧化酶类，如超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶、过氧化物酶、硫氧还蛋白酶系统和谷胱甘肽酶系统等。各种不同类型的自由基清除剂在医药和化妆品领域具有极大的应用潜力，如维生素C、超氧化物歧化酶（SOD）和小分子抗氧化多肽。 

务川臭蛙（Odorrana wuchuanensis)属于两栖纲无尾目蛙科臭蛙属，为中国特有种，仅分布于贵州省务川仡佬族苗族自治县。目前关于务川臭蛙来源抗氧化多肽的研究还没有报道。 

发明内容

技术要求 

本发明所要解决的技术问题是提供一种务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G。

本发明还要解决的技术问题是提供上述蛋白片段的编码序列。 

本发明还要解决的技术问题是提供上述基因片段在制备抗氧化药物或化妆品添加剂的应用。 

本发明是这样实现的：一种务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G，它是具有序列表中SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白，或者是将SEQ ID NO：2的氨基酸残基序列经过一个以上氨基酸残基的取代、缺失或添加，且具有与SEQ ID NO：2的氨基酸残基序列相同活性的由SEQ ID NO：2衍生的蛋白质。 

所述的务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G具有序列表中SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列；该务川臭蛙抗氧化肽是直链多肽，含有26个氨基酸残基，分子量为3016.60 Da，等电点为10.30。 

务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G的编码基因，它是下列核苷酸之一： 

（1）序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；

（2）编码序列表中SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列的多核苷酸；

（3）在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO：1限定的核苷酸序列杂交的核苷酸序列。

务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G的编码基是序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。 

务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G在制备抗氧化药物或化妆品添加剂的应用。 

有益效果 

通过基因工程的方法将本发明提供的务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G具有极强的抗氧化活性、分子量小、结构简单、溶血活性低、制备方法简单的特点，将其应用在抗氧化药物或化妆品添加剂中，可以提高药物或化妆品添加剂的抗氧化效果。由于该基因是务川臭蛙本身存在的内源基因，因此，该基因的超量表达不会影响其安全性，可广泛应用于药物或化妆品添加剂生产中。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。 

本发明的实施例1：务川臭蛙抗氧化肽wuchuanin-G基因克隆。 

1）务川臭蛙皮肤总RNA提取：