[发明专利]一种培育转基因抗虫水稻的方法

权利要求书

1.一种培育抗螟虫的转基因水稻的方法，其特征在于，利用序列表SEQ ID NO：16所示的抗虫基因cry2A构建植物表达载体pBar13-Cry2A，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，通过农杆菌介导的遗传转化方法，将所述的表达载体pBar13-Cry2A导入到水稻受体中，使其在转基因水稻中表达cry2A基因，通过检测转基因水稻对水稻螟虫的抗性，获得抗螟虫的转基因水稻T2A-1。

2.一种植物表达载体pBar13-cry2A，其特征在于，该载体含有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。

3.一个水稻复合转基因结构，其特征在于：在权利要求1所述的转基因水稻T2A-1的水稻基因组第12染色体上，所述的复合转基因结构由以下所示的序列沿5’到3’方向顺序连接而成：

(i)SEQ ID NO：3所示的插入位点5’端侧翼序列；

(ii)SEQ ID NO：4所示的插入的外源基因序列；和

(iii)SEQ ID NO：5所示的插入位点3’端侧翼序列。

4.应用权利要求3所述水稻复合转基因结构的方法，其特征在于培育一种衍生抗虫水稻的材料，所述衍生水稻材料基因组第12染色体特定位点携带有权利要求1所述的由(i)SEQ ID NO：3所示的序列，(ii)SEQ ID NO：4所示的插入的外源基因序列，和(iii)SEQ ID NO：5所示的序列连接而成的复合转基因结构。

5.一种侧翼序列，其特征在于：所述的侧翼序列是在转基因水稻T2A-1的外源基因中插入一个片段，所述的片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

6.一种侧翼序列，其特征在于：所述的侧翼序列是在转基因水稻T2A-1的外源基因中插入一个片段，所述的片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示。

7.一种转基因抗虫水稻5’端侧翼序列的定性PCR检测方法，其特征在于：PCR反应中的引物对的DNA序列如下所示：

AD5-F1GCAACTCAAGAAGGACTCAATG；

ESP-ubi-RAGGCTGGCATTATCTACTCG。

8.一种转基因抗虫水稻3’端侧翼序列的定性PCR检测方法，其特征在于：PCR反应中的引物对的DNA序列如下所示：

Bar-1F ACAAGCACGGTCAACTTCC；

T2A-2R ATGCCAACACGCCCAATC。