[发明专利]制备人体或动物脱细胞组织的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备人体或动物脱细胞组织的方法。

背景技术

现有的人体或动物脱细胞组织的制备，由于工艺、处理剂等原因，处理时间长，效率低，易造成组织结构的破坏，影响产品质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种生产效率高，产品质量好的制备人体或动物脱细胞组织的方法。

本发明的技术解决方案是：

一种制备人体或动物脱细胞组织的方法，其特征是：包括下列步骤：

（一）组织初加工：将人体或动物的组织用机械方法去除表面脂肪，按临床用途制备成临床所需的各种形状；

（二）病毒灭活、脱脂、脱细胞：

依次经下列步骤处理：

（1）将经过初加工的人体或动物组织，用第一灭活、脱脂液进行病毒灭活和脱脂处理10~30分钟；所述第一灭活、脱脂液由0.1%~2%的过氧乙酸、1%~5%的氯化钠溶液、0.5~2%的表面活性剂及余量的水组成； 

（2）将经上述步骤处理的人体或动物组织用第二灭活、脱脂液进行病毒灭活和脱脂处理10~30分钟；所述第二灭活、脱脂液由1%-4%的烧碱、0.5%-2%的表面活性剂及余量的水组成；

（3）将经上述步骤处理的人体或动物组织用灭活、脱细胞液进行病毒灭活和脱细胞处理10~30分钟；所述灭活、脱细胞液由0.1%~2%的过氧乙酸、1%~5%的氯化钠溶液、0.5~2%的表面活性剂、0.2%~2%的胰酶或胰蛋白酶及余量的水组成，并用0.1%-4%的纯碱调pH值为5~7，处理温度为30℃-40℃；

（4）循环操作：根据组织的不同，将上述步骤（1）、（2）、（3）循环操作2~7次； 

（5）组织保存：将制备好的组织浸泡于保存液中，用PE或PVC材质的密封袋保存，根据需要保存1~12个月；所述保存液由0.1%~2%的过氧乙酸、1%~5%的氯化钠及余量的水组成，并用0.1%-4%的纯碱调pH值为5~7；

（6）冻干、包装、辐照消毒：将产品低温冷冻干燥，成型包装、再经γ射线辐照或环氧乙烷消毒灭菌，即为成品。

第一灭活、脱脂液中的表面活性剂为十二烷基磺酸钠或曲拉酮。

第二灭活、脱脂液中的表面活性剂为平平加、十二烷基氨基丙酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚或曲拉酮。

灭活、脱细胞液中的表面活性剂为十二烷基磺酸钠或曲拉酮。

步骤（4）循环操作时，皮肤组织循环操作2~3次；胸腹膜、食道黏膜、小肠黏膜、心包膜组织循环操作1~2次；血管、神经、心脏瓣膜、骨、软骨、肌腱组织循环操作3~7次。

本发明生产效率高，产品质量好；将人类或动物的组织如：皮肤、胸腹膜、食道黏膜、小肠黏膜、心包膜、血管、神经、心脏瓣膜、骨、软骨、肌腱等，用病毒灭活、脱脂、脱细胞等工艺处理后得到脱细胞组织，为一种无细胞的三维网状结构组织，保留细胞外基质成分。该方法制备的组织，可以作为人体植入性的修复材料，也可以作为组织工程细胞培养的支架材料。皮肤、胸腹膜、食道黏膜、小肠黏膜、心包膜等也可作为创面覆盖材料。

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

一种制备人体或动物脱细胞组织的方法，包括下列步骤：

（一）组织初加工：将人体或动物的组织（本实施例为：胸腹膜、食道黏膜、小肠黏膜或心包膜组织）用机械方法去除表面脂肪，按临床用途制备成临床所需的各种形状；

（二）病毒灭活、脱脂、脱细胞：

依次经下列步骤处理：

（1）将经过初加工的人体或动物组织，用第一灭活、脱脂液进行病毒灭活和脱脂处理30分钟；所述第一灭活、脱脂液由2%的过氧乙酸、1的氯化钠溶液、2%的表面活性剂及余量的水组成；用过氧乙酸和氯化钠溶液进行灭活，同时加入表面活性剂进行脱脂，在病毒灭活的同时又达到脱脂的效果，具有脱脂时间短、效率高、对组织结构的保护作用强的特点。

（2）将经上述步骤处理的人体或动物组织用第二灭活、脱脂液进行病毒灭活和脱脂处理20分钟；所述第二灭活、脱脂液由4%的烧碱、1%的表面活性剂及余量的水组成；用2%的烧碱进行病毒灭活，同时加入0.5%%的表面活性剂进行脱脂，具有脱脂时间短、效率高、对组织结构的保护作用强的特点。