[发明专利]检测吡虫啉的酶联免疫试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 201310123319.9 | 申请日: | 2013-04-10 |
| 公开(公告)号: | CN104101712A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
| 发明(设计)人: | 何方洋;万宇平;罗晓琴;杨学林;冯静;贾芳芳;杨烁;齐向武 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 检测 吡虫啉 免疫 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测吡虫啉的酶联免疫试剂盒,其特征在于包括:包被有包被原的酶标板、特异性抗体、酶标记物、吡虫啉标准品溶液、底物显色液、终止液、洗涤液、复溶液,所述包被原为吡虫啉偶联抗原,所述酶标记物为酶标记抗抗体。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述吡虫啉偶联抗原是由吡虫啉半抗原与载体蛋白偶联得到,所述载体蛋白可为鼠血清蛋白、甲状腺蛋白、牛血清白蛋白、兔血清蛋白、人血清蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或纤维蛋白原。
3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于所述吡虫啉半抗原是由氧化还原反应得到,分子结构式为:
。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述吡虫啉特异性抗体是以吡虫啉偶联抗原作为免疫原制备获得,所述吡虫啉特异性抗体可为吡虫啉单克隆抗体或吡虫啉多克隆抗体。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体或羊抗兔抗抗体。
6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述酶标记物的标记酶为辣根过氧化物酶或细菌提取碱性磷酸酯酶,当标记酶为辣根过氧化物酶时,底物显色液A液为过氧化氢或过氧化脲,底物显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺,终止液为1~2mol/L的硫酸或盐酸缓冲液;当标记酶为细菌提取碱性磷酸酯酶时,底物显色液为对硝基磷酸盐缓冲液,终止液为1~2mol/L氢氧化钠。
7.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述洗涤液为pH值为7.4,含有0.5%~1.0%吐温-20、0.01‰~0.03‰叠氮化钠防腐剂、0.1~0.3mol/L的磷酸盐缓冲液;所述复溶液为pH值为7.0、0.1mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为重量体积百分比。
8.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述吡虫啉标准品溶液的浓度分别为0μg/L、4μg/L、12μg/L、36μg/L、108μg/L、324μg/L。
9.一种检测样品中吡虫啉含量的方法,包括步骤:
(1)样品前处理;
(2)用权利要求1~8任一项所述的试剂盒进行检测;
(3)分析检测结果。
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