[发明专利]HMG粗品的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于技术生物医药技术领域，具体涉及一种HMG粗品的制备方法。

背景技术                          

人绝经期促性腺激素(human menopausal gonadotropin，HMG)是由绝经期妇女尿中提取的物质，含有FSH和LH，其促卵泡发育的作用主要是FSH。人绒毛膜促性腺激素(human chorionic，gonadotropin，HGG)是妊娠妇女尿中提取的物质，可使成熟卵泡排卵，或用于HMG疗法后的黄体支持疗法。

现有的HMG的制备方法是：取绝经期的妇女尿液，在尿液中加入高岭土，再采用压滤机压饼，同时加入氨水，脱出有效成分液体，液体再进入超滤机，超滤到原体积的15%，再加入丙酮溶液沉淀，有效成分沉淀下来，沉淀置于离心机离心，再真空干燥，得到成品HMG。以上的方法中所采用的高岭土其价格昂贵，因此导致HMG的生产成本较高，在以上的方法时，有时会采用珍珠盐作为助滤剂，其成本也较高；另外以上的方法其缺点于，压滤机的成本较高。

因此需要针对以上的方法进行改进，降低HMG的生产成本。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种成本低、步骤简单、易于工业化生产的HMG粗品的制备的方法。

HMG粗品的制备方法，包括下述的步骤：

a.收集绝经期妇女尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调pH值到3.8-4.0，静置3-5小时后除去沉淀； 

b.在步骤a中除去沉淀后的尿液中加入硅胶，所述的硅胶的加入量为尿液重的0.6-1.5%，搅拌1.5-3小时，静置0.5-1.5小时； 

c.取上清液，干燥沉淀；

d.将沉淀置于洗脱柱中，用40-60%的丙酮和1/20-1/10mol的无水乙酸钠洗脱；

e.在洗脱液中加入丙酮，至丙酮的浓度达到65-80%之间，在4-10℃的温度区间静置6-10小时；

f.取出上清液，回收，将沉淀用无水乙醇洗涤，真空干燥，得HMG的粗品。

优选的，步骤d中，洗脱的条件为：洗脱柱高1米，上样60cm，每吨尿液的洗脱柱粗横截面为0.042m²，洗脱时间为1.5-2.5小时，洗脱完毕，每吨尿液每小时流洗脱液9-11L。

更优选的，步骤d中，洗脱的条件为：洗脱柱高1米，上样60cm，每吨尿液的洗脱柱粗横截面为0.042m²，洗脱时间为2小时，洗脱完毕，每吨尿液每小时流洗脱液10L。

优选的，步骤e中，在洗脱液加入丙酮至丙酮的浓度达到70%，在4-10℃的温度区间静置8小时。

步骤a中，绝经期妇女尿液中，不得检出艾滋病毒、乙肝病毒HBs-Ab、HBc-Ab、Hbe-Ab。

步骤a中，成品HMG粗品中不得检出艾滋病毒、乙肝病毒HBs-Ab、HBc-Ab、Hbe-Ab。

步骤b中采用的硅胶为经处理的硅胶，其处理步骤是：将硅胶用纯净水洗至pH 7，然后置于6mol/L盐酸内浸泡2小时，最后再用纯净水将硅胶洗至pH值4-6，采用该方法处理过的硅胶，其吸附能力更强。

优选的，HMG粗品的制备方法，包括下述的步骤：

a.收集绝经期妇女尿液，采用40目滤网过滤，用乙酸调pH值到3.9，静置4小时后除去沉淀； 

b.在步骤a中除去沉淀后的尿液中加入硅胶，硅胶的加入量为尿液重的1%，搅拌2小时，静置1小时，以上的硅胶为经处理的硅胶，其处理步骤是：将硅胶用纯净水洗至pH 7，然后置于6mol/L盐酸内浸泡2小时，最后再用纯净水将硅胶洗至pH值4-6； 

c.取上清液，干燥沉淀；

d.将沉淀置于洗脱柱中，用50%的丙酮和1/15mol的无水乙酸钠洗脱；

e.在洗脱液中加入丙酮，至丙酮的浓度达到70%之间，在4℃下静置8小时；

f.取出上清液，回收，将沉淀用无水乙醇洗涤，真空干燥，得HMG的粗品。

本发明的有益效果在于，采用以上的方法制备HMG粗品，和传统的HMG粗品的制备方法相比，其成本低，不需要采用高岭土、珍珠盐，还不需要采用压滤机，节约了成本；步骤简单，不需要采用超滤的步骤，简化了步骤。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。

实施例1

HMG粗品的制备方法，包括下述的步骤：