[发明专利]一种表皮组织培养方法、制得的表皮组织培养物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于细胞培养领域，具体涉及一种表皮组织培养方法，该方法获得的表皮组织培养物以及该表皮组织培养物在皮肤美容领域中的应用。

背景技术

表皮组织培养物在医疗和美容领域有着广泛的应用。例如，从表皮细胞核真皮细胞培养得到的表皮片组织可用于烧伤部位的治疗。对于一些疤痕情况也可采用这种治疗方法。大面积黑痣切除后，通常也需要贴上培养的表皮组织，治疗黑痣而不留疤痕。

决定皮肤颜色最重要的因子是一种被称为黑色素的色素性物质。黑色素的形成是由存在于表皮基底层的黑色素细胞产生的。而后天性色素脱失症的寻常型白癜风，就是由于黑色素的形成受到了异常的阻碍，或者黑色素细胞消失所引起的。目前，治疗白癜风的方法包括激素治疗以及光化学疗法。但是，这些疗法的预后不稳定，需要持续性治疗。

除上述治疗方法外，也有从其他部位取皮或毛囊进行移植的治疗方法。但是，这种疗法会造成与治疗部位同等面积的皮肤缺损，因此当治疗部位面积相对大时就不能进行此类治疗了。另外，也有从自体采取黑色素细胞，经过体外培养后再注射移植的治疗方法。此疗法与自体取皮相比，可以进行相对大面积的治疗，但是在注射部位造成色素分布不均，大面积治疗时要达到色素的均匀分布是非常困难的。

针对上述问题，本发明提供了一种新的表皮组织培养方法，该方法包括在以表皮角质细胞数量为100的情况下，黑色素细胞数量在0.01～50之间的细胞数量比进行培养。出人意料的是，该方法制备得到的表皮组织培养物具有完整的成片状形状，在美容和医疗应用时能够实现大面积的色素均匀分布。

发明内容

白癜风是一种常见多发的色素性皮肤病，该病以局部或泛发性色素脱失形成白斑为特征，是一种获得性的，皮肤色素脱失形成的白色斑片。寻常型白癜风的主要病因为色素异常，所以普遍认为寻常型白癜风的治疗不需要表皮角质细胞。但是，本发明的发明者使用黑色素细胞和表皮角质细胞共同培养的混合物，成功地对大面积寻常型白癜风患者进行了移植治疗，且术后效果显著，色素亦能均匀地再生。

因此，在本发明的一方面，提供了一种表皮组织培养方法，该方法包括将黑色素细胞和表皮角质细胞所组成的培养混合物在以表皮角质细胞数量为100的情况下，黑色素细胞数量在0.01～50之间的细胞数量比进行培养。

在本发明的一个实施方式中，表皮组织培养物的培养时间为10-50天。

在本发明的一个实施方式中，在没有使用小鼠等动物来源的异种滋养细胞层的情况下进行培养。

在本发明的另一方面，提供了一种表皮组织培养物，该表皮组织培养物是通过将黑色素细胞和表皮角质细胞所组成的培养混合物在以表皮角质细胞数量为100的情况下，黑色素细胞数量在0.01～50之间的细胞数量比进行培养得到的。

在本发明的一个实施方式中，表皮组织培养过程中使用的黑色素细胞和表皮角质细胞是自体获得的。

在本发明的一个实施方式中，本发明方法的培养得到的表皮组织培养物有完整的成片状的形状。

在本发明的一个实施方式中，本发明方法的培养得到的表皮组织培养物累积有2～10层的细胞层状态。

在本发明的一个实施方式中，本发明方法的培养得到的表皮组织培养物中的黑色素细胞有树枝状结构。

在本发明的又一方面，提供了一种表皮组织培养物在制备皮肤美容产品中的应用。

在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备美白产品中的应用。在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备白癜风治疗产品中的应用。在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备痤疮治疗产品中的应用。在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备烧伤治疗产品中的应用。在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备大面积黑痣治疗产品中的应用。在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备纹身治疗产品中的应用。在一些实施方式中，本发明提供了表皮组织培养物在制备过度晒伤治疗产品中的应用。

本发明表皮组织培养方法的优点包括：

（1）适用于治疗大面积的皮肤损伤(例如，寻常型白癜风、过度晒伤、大面积黑痣、烧伤、疤痕、痤疮、纹身等等)，并能达到色素均匀分布的再生效果；

（2）适用于美白产品，例如适用于考核美白效果时对黑色素细胞进行的药效评价；

（3）由于所得表皮组织培养物的形态是皮片状的，所以进行移植也非常简易；以及

（4）在优选的实施方式中，黑色素细胞和表皮角质细胞来源于同一个体，移植后不会有排异反应发生，预后也良好。