[发明专利]一种从苹果皮中分离熊果酸的方法

说明书

技术领域

本发明属天然药物领域，具体涉及一种从苹果皮中分离活性成分熊果酸的方法。

技术背景

我国苹果产地主要集中在河南、山东、陕西等地，并且在苹果产地建有较大数量和规模的果脯或果汁等生产企业，这些企业在生产过程中每天有大量的苹果皮渣产生并成为废物被处理掉。因此，产生大量浪费的同时还造成了环境的污染。苹果皮中熊果酸含量较高，为提取和分离熊果酸提供了优良的原料。本发明分离工艺简单，成本低，收率高，非常适合工业化生产，具有很高的经济与社会效益。

熊果酸(Ursolic acid)又名乌苏酸或乌索酸，属三萜类化合物，分子式为C₃₀H₁₈O₃，化学名称为3β-羟基-熊果烷-12-烯-28-羧酸。熊果酸具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应；同时熊果酸还具有明显的抗氧化性，因而被广泛地应用于医药和化妆品原料。在一些重大疾病上，熊果酸具有保肝、抗肝炎、抗肿瘤的作用，甚至对于艾滋病亦有很好的抑制作用。

韩宁娟申请的“一种苹果中总三萜类化合物的提取分离方法有其应用”的发明专利（申请号200910021258.9）以及何祥久等人申请的“一种苹果总三萜的制备方法及用该法制备的苹果总三萜”的发明专利（申请号201010163527.8）都是申请制备苹果总三萜的发明专利，并没有具体涉及制备熊果酸晶体的内容。本发明人曾申请的发明专利“一种从车前草中分离熊果酸的方法”（申请号201210120392.6）公开了从车前草中分离熊果酸的方法，但是车前草与苹果皮在性质上存在较大的差异，直接采用申请号201210120392.6的方法所得熊果酸提取效率低、纯度较低。

发明内容

本发明目的在于提供一种从苹果皮中分离熊果酸的方法。

经过本发明人的大量实验、摸索，发现苹果皮中存在较多的水溶性成分如苹果胶等，严重影响对熊果酸的分离提取。所以本申请在提取之前采取了水提等方式去除水溶性成分苹果胶等成分。本工艺具体步聚如下：

（1）取新鲜苹果皮、或干苹果皮、或榨汁后的苹果渣，粉碎，按液固比ml/g20/1～100/1加入水、或盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、亚硫酸、柠檬酸、酒石酸、乙酸、乳酸和苹果酸的水溶液任一种或几种混合物、或纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的水溶液任一种或几种混合物，在20-100℃下加热回流或功率100～1000w的超声波或100～1000w功率的微波辅助提取1～3次，每次0.1～3小时，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心后得苹果渣，备用；或直接取脱除苹果胶后的果皮备用；

（3）取滤渣，按液固比mL/g 4/1～40/1加入中等极性溶剂、体积比浓度50%～100%的低碳链醇水溶液，在20-90℃下，加热回流或功率100～1000w的超声波或100～1000w功率的微波辅助提取1～3次，每次0.1～3小时，搅拌速度0～2000r/min，合并提取液，常压或减压回收溶剂得浸膏；

（4）取浸膏，按液固比mL/g 10/1～100/1加入低极性溶剂，在20-90℃下，加热回流脱脂或功率100～1000w的超声或100～1000w功率的微波辅助脱脂1～4次，每次0.1～3小时，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，取不溶物，得到脱脂后的浸膏；

（5）取脱脂后的浸膏，按液固比mL/g 10/1～500/1加入体积比浓度50%～100%低碳链醇或它们的水溶液，使脱脂后浸膏溶解，在20-90℃下，按脱脂后浸膏质量g/g的1/50～5/1加入活性炭，加热回流或功率100～1000w的超声或100～1000w功率的微波辅助脱色1～5次每次0.1～3小时，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，常压或减压回收溶剂得到熊果酸粗品；如果前一步骤所得脱脂后的浸膏颜色较浅，则本步骤可以省略；

（6）取熊果酸粗品，按液固比mL/g 20/1～500/1加入体积比浓度50%～100%低碳链醇水溶液、或乙酸乙酯或乙酸乙酯与低碳链醇体积比1/9～9/1的混合物，进行结晶或重结晶，过滤或离心得到熊果酸晶体。

所述低碳链醇是甲醇、乙醇或它们的任意比混合物中的一种。

所述中等极性溶剂是二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙烷、乙酸乙酯或它们的任意比混合物中的一种。

所述低极性溶剂是石油醚、正己烷、环己烷、正庚烷或它们的任意比混合物中的一种。