[发明专利]收集、保存尿液蛋白的方法及设备

说明书

技术领域

本发明涉及收集、保存尿液蛋白的方法及设备。具体而言，本发明涉及利用吸附蛋白的滤膜长期保存尿液蛋白的方法和装置。

背景技术

对于医学研究和医疗实践来说，生物标本都具有重大的价值。然而当前的医学实践中生物样本并没有像病历那样被全面的保存起来。这可能是由于生物样本的采集往往具有创伤性，生物样本的保存在技术上具有难度而且费用昂贵。

尿液是一种重要的体液，含有病人丰富的信息，更重要的是，它是一种可以完全无创采集的生物样本。尿蛋白被认为含有肾脏疾病的潜在标志物。事实上，人体内很难再找到像尿液这样的一种生物样本，既可以完全无创采集，又如此接近体内的一种器官并反映该器官的状态。更重要的是，由于尿液是血浆在肾脏的滤过产物，因此尿蛋白中不仅包含泌尿系统的信息，而且包括整个身体的信息。

综上所述，尿液是体内的一种重要的生物样本，随着病程的进展，每一阶段的尿液蛋白都应该保持下来。大量尿液蛋白的保存将促进以后蛋白标志物的临床样本验证，利于生物标志物的研究以及最终向临床应用的转化。

目前，尿液的保存一般是冻存在-80°C的冰箱里。由于尿液体积大，蛋白浓度低，尿液的保存往往需要巨大的体积。更为严重的是，尿液蛋白保存在液体中时，即便是冻存在-80°C的环境中，也比保存在干燥的条件下易于降解的多。

吸附蛋白的滤膜是指具有吸附蛋白能力的滤膜，主要包括PVDF膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜和玻璃纤维膜。

PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜（polyvinylidene fluoride），具有较高的机械强度，是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。截至目前，PVDF膜主要应用于斑点杂交，蛋白质印记实验中，并未见到将其用于尿液蛋白吸附和保存的报道。同样地，也未见将其他的滤膜用于尿液蛋白吸附和保存的报道。

因此，开发出一种简单廉价的保存尿蛋白的方法，可以作为全面保存生物样本的开始。本发明将尿蛋白快速干燥保存在吸附蛋白的滤膜上，简单环保经济，为大规模全面保存病人蛋白生物样本提供了可能性。

发明内容

因此，本发明的技术目的是寻找一种能简单地长期保存尿液蛋白的新方法和相应的装备。

因此，本发明的第一方面涉及一种保存尿液蛋白的方法，其包括下述步骤：

a）获取尿液样本；

b）利用离心方法或低蛋白吸附滤膜去除尿液中的细胞和细胞碎片；

c）在漏斗上放置2到8张用水浸润的滤纸，将吸附蛋白的滤膜依次浸入甲醇中进行活化和纯净水中进行清洗，然后置于滤纸之上，所述滤纸和吸附蛋白的滤膜能保证液体只能通过它们流入下部空间；优选地，滤纸为4-6层；优选地，吸附蛋白的滤膜为单层；

d）将处理后的尿液导入漏斗中，使尿液全部滤过滤膜；

e）将吸附蛋白的滤膜取下、干燥。

优选地，所述尿液样本为新鲜收集的尿液；

其中所述吸附蛋白的滤膜选自PVDF膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜和玻璃纤维膜；优选地，所述吸附蛋白的滤膜是PVDF膜。

优选地，所述漏斗为布氏漏斗。优选地，步骤d）中，通过接入真空抽滤装置加速尿液的滤过。

优选地，步骤e）的干燥步骤采取灯光烘烤、室温自然干燥或真空冷冻干燥的方式进行。

优选地，上述方法还包括步骤f）将获得的吸附蛋白的滤膜连同记录有尿液样本信息的标签纸放入独立的密封装置中保存。

本发明的第二方面涉及一种用于上述第一方面所述方法的装置，其包括下述部件：

漏斗；置于漏斗内的4-6层滤纸；置于滤纸上的吸附蛋白的滤膜；

其中，吸附蛋白的滤膜预先依次浸入甲醇中进行活化和纯净水中进行清洗且吸附蛋白的滤膜选自PVDF膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜和玻璃纤维膜；优选地，吸附蛋白的滤膜是PVDF膜。

优选地，所述滤纸在使用前用水浸润。

优选地，所述漏斗为布氏漏斗。优选地，所述漏斗与真空抽滤装置连接。