[发明专利]一种适用于本生烟种子快速萌发的消毒方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种种子消毒处理方法，特别是一种本生烟种子消毒处理方法，属于生物技术和现代农业技术领域。

二、背景技术

本生烟是研究植物病毒基因功能、转基因植物抗病毒机制和植物蛋白瞬时表达的重要模式植物，其具有生长速度快，生命周期短等优点。在本生烟无菌苗制备和组织培养过程中种子消毒是工作的第一环节，常规的方法是先用70％乙醇消毒30s，升汞浸泡15分钟，然后用无菌水清洗。该处理方法步骤繁琐，同时升汞容易残留，影响种子萌发，使发芽势减弱。

三、发明内容

本发明的目的在于克服现有消毒方法的不足，提供一种本生烟种子消毒处理方法，使本生烟种子消毒彻底，无污染，又不影响种子萌发，幼苗生长健壮，生长速度快。本发明是通过以下技术方案来实现的：采用单一浓度的次氯酸钠溶液对种子消毒15分钟，可以杀死各种微生物，然后在超净工作台中用无菌水清洗种子5次，清洗后种子用无菌水在25℃浸泡12小时，然后播种，种子萌发率在98％以上，发芽势强，同时后期幼苗生长健壮。

本发明具体的方法步骤如下：

(1)选取适量饱满的本生烟种子，在密闭容器(如离心管)中加入新鲜配制10％次氯酸钠溶液室温浸泡15分钟，并不时摇晃。

(2)在超净工作台中用无菌水清洗种子5次，然后在密闭容器(如离心管)加入适量无菌水，以浸没种子为好。

(3)把密闭容器连同无菌水清洗后种子一起放在25℃处理12小时，然后在超净工作台中把种子播种在MS基本培养基上。

(4)置于25℃光照培养箱中培养，经培养15天左右得到萌发的幼苗。

本发明具有显著的特点，解决了本生烟种子由于消毒不彻底而造成污染，得到无菌苗较少问题；同时解决由于常规方法消毒时间长而影响本生烟种子的萌发率和幼苗生长势问题。与常规消毒方法相比，该消毒方法所需试剂少，操作流程简单，而且消毒后的种子经过一段时间的水合作用，萌发率和发芽势增强，后期幼苗生长健壮，能够满足各种实验所需。