[发明专利]菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因及其植物表达载体和应用有效
| 申请号： | 201310096562.6 | 申请日： | 2013-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN103146712A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 陈发棣;赵民;蒋甲福;陈素梅;李佩玲;宋爱萍;房伟民 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛;傅婷婷 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菊花 bhlh 转录 因子 cmbhlh1 基因 及其 植物 表达 载体 应用 | ||
1.菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因，其特征在于该基因的序列为SEQ ID NO.1。
2.含菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因的植物表达载体，其特征在于由权利要求1所述的菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因与植物表达载体构成。
3.根据权利要求2所述的含菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因的植物表达载体，其特征在于所述的植物表达载体是将CmbHLH1基因插入pCAMBIA1301表达载体的BamH I和Sac I酶切位点所得。
4.权利要求2或3所述的菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因植物表达载体的构建方法，其特征在于包括如下步骤：
1）菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因的克隆
设计引物以菊花‘钟山紫桂’cDNA为模板，利用PCR反应扩增上、下游分别含BamH I和Sac I酶切位点的CmbHLH1基因；其中使用的引物序列为：CmbHLH1-Sense-F：SEQ ID NO.4，CmbHLH1-Sense-R:SEQ ID NO.5，CmbHLH1-Antisense-F:SEQ ID NO.6，CmbHLH1-Antisense-R:SEQ ID NO.7；
2）植物表达载体pCAMBIA1301-（+/-）-CmbHLH1的构建
将PCR产物连接到pMD19-T Simple载体，转化DH5α感受态细胞，提取阳性质粒，BamH I和Sac I双酶切的CmbHLH1片段与BamH I和Sac I双酶切的pCAMBIA1301载体片段连接，转化，提取阳性质粒，电泳检测并测序验证为SEQ ID NO.1，植物表达载体pCAMBIA1301-(+/-)-CmbHLH1构建成功。
5.权利要求1所述的菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因在菊花品种改良中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因在创制高铁离子吸收菊花新种质中的应用。
7.权利要求2所述的含菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因的植物表达载体在菊花品种改良中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于所述的含菊花bHLH转录因子CmbHLH1基因的植物表达载体在创制高铁离子吸收菊花新种质中的应用。
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