[发明专利]一种磷酸果糖激酶及其编码基因的应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下1)或2)所示的蛋白质：

1）由序列表中的SEQ ID№.1的氨基酸残基序列组成的蛋白质；

2）将序列表中的SEQ ID№.1氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有磷酸果糖激酶功能的由SEQ ID№：1衍生的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质为具有磷酸果糖激酶功能的蛋白质。

3.权利要求1或2所述的蛋白的编码基因。

4.根据权利要求3所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因的cDNA核苷酸序列如下1)、2）、3）或4）所示：

1）序列表中SEQ ID№：2的核苷酸序列；

2）序列表中SEQ ID№：2自5′末端第127-1554位核苷酸所示的核苷酸序列；

3）在严格条件下可与1）或2）所述的DNA序列杂交的核苷酸序列；

4）与序列表中SEQ ID№：2的核苷酸序列具有90％以上的同源性的且编码蛋白具有磷酸果糖激酶功能的核苷酸序列。

5.根据权利要求3所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因的基因组基因的核苷酸序列如下1)、2）、或3）所示：

1）序列表中SEQ ID№：3的核苷酸序列；

2）在严格条件下可与1）所述的DNA序列杂交的核苷酸序列；

4）与序列表中SEQ ID№：3的核苷酸序列具有90％以上的同源性的且编码蛋白具有磷酸果糖激酶功能的核苷酸序列。

6.含有权利要求3或4或5所述的编码基因的重组表达载体、转基因细胞系或转基因重组菌。

7.权利要求1所述的蛋白及其编码基因在培育能以甘露醇为唯一碳源培养的转基因工程菌中的应用。

8.权利要求1所述的蛋白及其编码基因在培育能以甘露醇为碳源培养的转基因工程菌中的应用。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于：所述培育能以甘露醇为唯一碳源培养的转基因菌株的方法或者培育能以甘露醇为碳源培养的转基因工程菌的方法是将权利要求3、4或5所述的基因转入出发菌株中，筛选得到转基因工程菌；所述出发菌株为大肠杆菌，优选为大肠杆菌磷酸果糖激酶缺陷株RL257；所述权利要求3、4或5所述的基因通过重组表达载体转入出发菌株中；所述重组表达载体为将权利要求3、4或5所述的基因与pEASY-E1连接获得的重组表达载体。

10.权利要求1所述的蛋白及其编码基因在制备磷酸果糖激酶中的应用。