[发明专利]一种降解石油的耐油耐盐菌株及其筛选方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物育种及生态领域，尤其是一种降解石油的耐油耐盐菌株及其筛选方法和应用。 

背景技术

石油作为主要的能源物质对人类社会的发展起到了至关重要的作用，但在石油开采、运输、装卸、加工和使用过程中不可避免的会对环境造成污染。据不完全统计，全世界每年约有1.0 ×10¹⁰ kg石油通过各种途径进入土壤或水体，污染地下水、流入海洋，改变水生环境，使水体动植物和海洋生物都受到威胁。随着全球环境的不断恶化，生态环境的安全越来越受到人们的关注。

石油对环境的危害主要集中在海洋和土壤。石油漂浮在海面上，迅速扩散形成油膜，可通过扩散、蒸发、溶解、乳化、光降解以及生物降解和吸收等进行迁移、转化。油类可沾附在鱼鳃上，使鱼窒息；抑制水鸟产卵和孵化，破坏其羽毛的透水性，降低水产品质量。形成的油膜阻碍水体的复氧作用，影响海洋浮游生物生长，破坏海洋生态平衡，此外，还可破坏海滨风景，影响其旅游环境等。石油进入土壤后则改变土壤的有机质组成和结构，影响土壤中微生物的生长繁殖和分布变化；大量的石油会堵塞土壤孔隙，对土壤中酶的活性也有抑制作用；另外，石油经过土壤生态系统的一系列作用后某些成分在作物中形成积累，从而影响粮食质量，并进入食物链，危及人类健康。

石油污染的处理方法主要有物理法、化学法、生物法及不同方法的组合。物理处理法的特点是相对简单、安全，适用于突发溢油的回收并控制溢油的扩散。化学方法是见效快，即使在恶劣的天气下也可以在短时间内处理大面积的溢油，但缺点是使用消油剂等化学药剂浪费能源，可能产生二次污染；凝油性能较低，生产工艺复杂，成本偏高，价格昂贵，难以在实际中得到应用。生物处理法，自然界中存在着大量能够降解石油的微生物，通过人工筛选、培育，甚至改良这些微生物，然后将其投放到受污染区。石油烃类的生物降解，具有成本低、见效快、无污染的特点。生物修复技术是国际上具有发展潜力的环境污染治理技术。

通过检索，发现以下几篇与本专利申请相关的专利公开文献：

1. 耐低温石油降解菌株、培养方法、培养基及其应用（CN102021128A），本发明涉及耐低温石油降解菌株、培养方法、培养基及其应用，本发明的耐低温石油降解菌株为Paracoccus sp.D17和Paracoccus sp.D24；筛选上述两种菌用液体培养基，该培养基由每1000 mL培养基液体由0.5 g NaCl，0.1 g K₂HPO₄，0.1 g NH₄H₂PO₄，0.1 g (NH₄)₂SO₄，0.02 g MgSO₄·7H₂O，0.3 g KNO₃，700-900 mL油田废水和余量的超纯水组成；筛选上述两种菌用的固体培养基，其由液体培养基每1000 mL另外加入15～20 g琼脂，再在培养基表面均匀涂20～30 μL灭菌原油形成；上述两种菌应用于石油烃降解和土壤或水体石油污染的生物修复中。本发明的两种低温菌可应用于低温环境中，对低温环境中土壤石油污染的治理具有重大价值。

2. 一株降解石油的细菌及其应用（CN1580241），公开了一株降解石油的细菌及其应用。本发明所提供的降解石油的细菌是蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)HP CGMCC №1141。实验证明，该菌株能有效地改善原油的性质，原油酸值提高8倍以上，轻组份增加，含蜡含胶降低率30%－50％，原油流变性变好，油水间界面张力降低，发酵液中有机酸等物质含量增加；其代谢原油途径为次末端氧化，产生了一种新型脂类表面活性剂。该菌株可广泛应用于采油工程领域特别是微生物强化采油领域。 

3. 一株降解石油烃的菌株及其应用（CN101691552A），公开了一株降解石油烃的菌株及其应用。该菌株为柠檬酸杆菌(Citrobacter sp.)WTS，其保藏编号为CGMCC No.3253。本发明的菌株具有很强的降解石油烃的能力。本发明的菌株、菌剂及其应用方法为我国进行石油污染土壤的生物修复工作提供理论依据，对我国油田地区环境保护工作以及石油运输过程中因泄漏而造成污染的修复工作具有重大意义，加快石油污染生物修复工作的进展，具有重要的经济意义。

通过对比，本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。

发明内容