[发明专利]土鳖虫蛋白酶酶解物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药制药领域，具体涉及土鳖虫酶解物及其应用。

背景技术

土鳖虫为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensis Walker 或冀地鳖Steleophaga plancyi（Boleny）的雌虫干燥体；主产于江苏、湖北、河南、河北等地；味咸，寒；有小毒；归肝经。主要功能为破血逐瘀，续筋接骨。用于跌打损伤，筋骨骨折，血瘀经闭，产后瘀阻腹痛，癥瘕痞块。

土鳖虫目前报道的主要成分为挥发油和氨基酸。但具体活性成分未有文献报道，传统中药以土鳖虫全虫入药，存在着服用剂量大，易造成微生物污染等弊病。鉴于动物类蛋白质、粘多糖等大分子物质只有到达胃肠道后受消化酶、酸、碱等作用，方可被酶解或者水解成小分子的肽、低聚糖和其他小分子物质，吸收入血而发生药效，故生物酶仿生提取方法模拟体内消化过程，提取的有效成分治疗效果更佳。

发明内容

本发明公开了一种土鳖虫蛋白酶酶解物及其应用，具有很好的抗凝血和溶栓作用。

本发明所采用的技术方案：

土鳖虫蛋白酶酶解物，由以下方法制备：

A、净选土鳖虫，粉碎成细粉；

B、将土鳖虫细粉置于人工胃液中，然后加入胃蛋白酶水解，得到胃蛋白酶酶解液，离心；

C、取上清液，干燥，得到土鳖虫胃蛋白酶酶解物；

D、取残渣转入人工肠液，加入胰蛋白酶水解，得到土鳖虫胰蛋白酶酶解物；

步骤C所得胃蛋白酶酶解物与步骤D所得胰蛋白酶酶解物即为土鳖虫蛋白酶酶解物。

土鳖虫蛋白酶酶解物，由以下方法制备：

A、净选土鳖虫，粉碎成细粉；

B、将土鳖虫细粉置于人工胃液中，密闭，于37℃恒温水浴30min，加入胃蛋白酶水解2-3小时，得到胃蛋白酶酶解液，将胃蛋白酶解液置于85℃恒温水浴15min，冷却至室温，离心；

C、取上清液，干燥，得土鳖虫胃蛋白酶酶解物；

D、取残渣加入人工肠液，密闭，于45℃恒温水浴30min后，加入胰蛋白酶水解2-4小时，将酶解液于85℃恒温水浴15min，冷却至室温，离心15min，取上清液，干燥，得土鳖虫胰蛋白酶酶解物；

步骤C所得胃蛋白酶酶解物与步骤D所得胰蛋白酶酶解物即为土鳖虫蛋白酶酶解物。

土鳖虫蛋白酶酶解物，由以下方法制备：

A、净选土鳖虫，粉碎成细粉；

B、向土鳖虫细粉中加入与土鳖虫细粉重量体积比为1：20的人工胃液，密闭，于37℃恒温水浴30min，加入2%胃蛋白酶水解2-3小时，得到胃蛋白酶酶解液，将胃蛋白酶酶解液，置于85℃恒温水浴15min，冷却至室温，以4200r/min离心15min；

C、取上清液，干燥，得土鳖虫胃蛋白酶酶解物；

D、取残渣加入20倍量人工肠液，密闭，于45℃恒温水浴30min后，加入4%胰蛋白酶水解2-4h，将酶解液于85℃恒温水浴15min，冷却至室温，以4200r/min离心15min，取上清液，干燥，得土鳖虫胰蛋白酶酶解物；

步骤C所得胃蛋白酶酶解物与步骤D所得胰蛋白酶酶解物即为土鳖虫蛋白酶酶解物。

土鳖虫蛋白酶酶解物，由以下方法制备：

A、净选土鳖虫，粉碎成细粉；

B、向土鳖虫细粉中加入与土鳖虫细粉重量体积比为1：20的人工胃液，密闭，于37℃恒温水浴30min，加入3%胃蛋白酶水解2-3小时，得到胃蛋白酶酶解液，用1mol/mlNaOH溶液调节酶解液的pH=6.8，将胃蛋白酶酶解液置于85℃恒温水浴15min，冷却至室温，以4200r/min离心15min；

C、取上清液，干燥，得土鳖虫胃蛋白酶酶解物；

D、取残渣加入20倍量人工肠液，密闭，于45℃恒温水浴30min后，加入3%胰蛋白酶水解2-4h，将酶解液于85℃恒温水浴15min，冷却至室温，以4200r/min离心15min，取上清液，干燥，得土鳖虫胰蛋白酶酶解物；

步骤C所得胃蛋白酶酶解物与步骤D所得胰蛋白酶酶解物即为土鳖虫蛋白酶酶解物。

土鳖虫蛋白酶酶解物，由以下方法制备：

A、净选土鳖虫，粉碎成细粉；