[发明专利]一种检测食管鳞癌标志物的蛋白质芯片及其试剂盒

说明书

  

技术领域

本发明属于生物芯片技术领域，特别涉及一种蛋白质芯片。应用该蛋白质芯片及其试剂盒筛查食管鳞癌特异蛋白标志物。 

  

背景技术

食管癌是世界上第8位最常见的恶性肿瘤之一，被认为是继胰腺癌之后第二位难以治愈的消化道恶性肿瘤。中国又是世界上食管癌发病率和死亡率较高的国家，占全世界的50%以上，每年约有25万新诊断的食管癌病例，发病率仅次于胃癌、肺癌、肝癌之后居第四位， 严重威胁着人类的生命健康。食管癌又分为食管鳞癌和腺癌，中国食管鳞癌的比例高达90%以上。食管癌的研究对降低发病率和死亡率具有非常重要的意义。目前食管癌筛查和诊断仍以食管内镜检查及食管粘膜碘染色为主，存在一定的弊端，如成本较高，检查效率低，侵入式检查使患者依从性差，还受到医生的技术水平等人为因素的影响，不适合用于早期筛查和临床检测。随着研究向分子生物学领域推进，从基因水平上研究筛查出异常基因，进行基因测序，发现突变位点，再寻找敏感的药物是一个治疗途径，但这个过程比较繁琐。随着对基因组认识的深入，人们发现药物通常是作用于基因编码的蛋白质而不是基因本身，虽然人类基因组包含了我们身体的全部遗传信息，但要经过一系列转录、翻译过程实现蛋白质表达，人体各种功能的发挥都是由蛋白质来完成的。蛋白质是生命活动的执行者和体现者,对蛋白质组的研究可以更深入、更贴近生命本质,这催生了一个新的科学领域――蛋白组学：专门研究人体大量未知的蛋白质、以及他们多样性的形态和功能。表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, SELDI-TOF-MS)技术是一种蛋白质组学研究技术,由血清与弱阳离子亲和蛋白芯片结合,用质谱仪读取血清蛋白图谱,用蛋白质指纹分析软件对质谱数据的分析而获得蛋白指纹。食管癌血清蛋白指纹由12个不同质荷比（M/Z）的蛋白质组成。但此种方法检测出的蛋白质的质荷比往往是多种蛋白质结合在一起，不能确定是哪一种蛋白质，而且有很多是人类未知的蛋白质，对后续个体化治疗和新药研制带来困难，逐渐不为人采用。选择人类已知的蛋白进行研究可以最快速度找到特异蛋白标志物。蛋白质又分为组织蛋白和血清蛋白，血清蛋白具有取样容易，样品处理简单，可反映身体即时的生理病理变化，适合作为肿瘤筛查、诊断以及病情监测的标志物。食管癌的发生发展是正常细胞经过多基因、多步骤的变化，逐渐演变成具有恶性增殖特性的癌细胞并不断转移播散的过程。食管癌细胞与增殖、凋亡、分化和转移相关的多种基因的表达都发生了改变，此种变化最终表现为细胞内各种蛋白质的表达和功能改变，从而影响细胞的生命活动。在癌变过程中发生改变的蛋白质和小肽可以经肿瘤细胞代谢、分泌释放到血液或其他体液中。因此，通过研究食管癌血清蛋白质的改变，有可能发现与食管癌相关或特异的蛋白质或肽类物质，即食管癌血清蛋白标志物。但血清蛋白的含量都是非常低的,即低丰度蛋白，所以血清蛋白检测存在一定难度。