[发明专利]以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味皂苷的方法无效
| 申请号： | 201310089329.5 | 申请日： | 2013-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN104059959A | 公开（公告）日： | 2014-09-24 |
| 发明（设计）人： | 王磊;刘金磊;卢凤来;杨子明;李典鹏;宋云飞;李元元 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所;桂林莱茵生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P33/00 | 分类号： | C12P33/00 |
| 代理公司： | 桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107 | 代理人： | 唐智芳 |
| 地址： | 541006 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 罗汉果 苦果 落地 原料 合成 甜味 皂苷 方法 | ||
1.以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味皂苷的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)苦味皂苷的制备：取罗汉果苦果或落地果，破碎，加水或45%～55%体积的乙醇提取，提取液过大孔树脂柱层析，水洗树脂柱至流出液无色，然后用70～90%体积的乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，干燥，得到罗汉果苦味皂苷，其中罗汉果苷Ⅱ和/或苷Ⅲ的含量≥50%；
2)酶催化反应：取罗汉果苦味皂苷溶于水中，加入罗汉果苦味皂苷重量1～4倍的淀粉，再按400～650U/g罗汉果苦味皂苷的量加入环糊精葡萄糖基转移酶，于60～65℃条件下酶催化反应至完全，灭酶活，反应液过滤，收集滤液；
3)后处理：所得滤液过大孔树脂柱或硅胶柱层析，水洗，乙醇梯度洗脱，收集30～40%体积的乙醇洗脱液；或者是将滤液直接过氧化铝柱或活性炭柱，收集流出液；将收集的30～40%体积的乙醇洗脱液或流出液浓缩、干燥，得到罗汉果甜味皂苷混合物。
2.根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂苷的方法，其特征在于：步骤1)中，所述大孔树脂为聚苯乙烯型。
3.根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂苷的方法，其特征在于：步骤2)中，所述的淀粉选自糊精、水溶性淀粉、马铃薯淀粉和玉米淀粉中的一种或两种以上的组合。
4.根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂苷的方法，其特征在于：步骤2)中，所述环糊精葡萄糖基转移酶的加入量为550～650U/g罗汉果苦味皂苷。
5.根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂苷的方法，其特征在于：步骤3)中，所述大孔树脂为聚苯乙烯型。
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