[发明专利]一种复合型微生物有机肥及其制备方法

权利要求书

1.一种复合型微生物有机肥，其特征在于，组分如下，均为重量份：

绿色木霉（Trichoderma viride）JUWEI002发酵液1～4份、枯草芽孢杆菌JUWEI001发酵液1～4份、草炭土20～30份、烟草渣33～38份、蚕沙33～38份、钙粉6～7份、黄腐酸钾1～2份；

所述的绿色木霉JUWEI002发酵液中活菌数≥9×10⁸个/ml，所述的绿色木霉JUWEI002已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC NO.7035，保藏时间为2012年12月24日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

所述的枯草芽孢杆菌JUWEI001发酵液中活菌数≥9×10⁸个/ml；由枯草芽孢杆菌JUWEI001发酵制得的，枯草芽孢杆菌JUWEI已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC NO.7034，保藏时间为2012年12月24日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

2.如权利要求1所述的复合型微生物有机肥，其特征在于，所述的黄腐酸钾规格为：细度＜120目，水可溶物≥99.7%，水溶性黄腐酸≥50%，氧化钾9.5～10%。

3.如权利要求1所述的复合型微生物有机肥，其特征在于，所述的草炭土细度为120目。

4.如权利要求1所述的复合型微生物有机肥，其特征在于，所述的烟草渣选用新鲜、无霉变的烟草渣，采用市售优质腐熟剂发酵腐熟后制得；

所述的蚕沙选用新鲜、无霉变的蚕沙，采用市售优质腐熟剂发酵腐熟后制得。

5.如权利要求1所述的复合型微生物有机肥，其特征在于，所述钙粉为贝壳粉。

6.权利要求1所述复合型微生物有机肥的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）将绿色木霉JUWEI002发酵液和枯草芽孢杆菌JUWEI001发酵液混合均匀，制得混合液；

（2）将草炭土用80～100℃热风烘干120min，制得除菌草炭土；

（3）将步骤（1）制得的混合液与步骤（2）制得的除菌草炭土混合吸附，经粉碎、过100目筛，然后与烟草渣和蚕沙混合，并添加钙粉和黄腐酸钾，混合均匀，以低于40℃热风低温干燥至含水量低于15%（w/w），制得复合型微生物有机肥。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述绿色木霉JUWEI002发酵液按照如下方法制备：

①用绿色木霉JUWEI002接种于平板PDA培养基；

②挑取菌落边缘菌丝转接于麸皮汁培养基中，培养温度28℃～30℃，200rpm，培养时间30～40h，制得绿色木霉JUWEI002培养液；

③以5%（w/w）的接种量将步骤②制得的绿色木霉JUWEI002培养液接种于麸皮汁发酵培养基中，发酵条件为：温度28～30℃，罐压：0.1Mpa，通风0.8～1vvm，搅拌速度180～200rpm，培养时间为6～8天，制得绿色木霉JUWEI002发酵液。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤①中的平板PDA培养基，每升组分如下：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL；

所述步骤②中的麸皮汁培养基组分如下，均为重量百分比：麸皮10%，蔗糖5%，余量水，自然pH值；

所述步骤③中的麸皮汁发酵培养基组分如下，均为重量百分比：麸皮6%，蔗糖3%，余量水，自然pH值。

9.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌JUWEI001发酵液按照如下方法制备：

a、将枯草芽孢杆菌JUWEI001，划线接种于牛肉膏蛋白胨培养基37℃培养45～50h；

b、接种环挑取菌体接种于玉米粉液体培养基中，180～200rpm，37℃培养22～26h；

c、以1%（w/w）接种量接种于玉米粉发酵培养基，进行发酵培养，发酵条件为：温度38℃，罐压：0.1Mpa，通风0.8～1vvm，搅拌速度180～200rpm，培养时间为3～4天，制得枯草芽孢杆菌JUWEI001发酵液。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述步骤a中的牛肉膏蛋白胨培养基每百毫升组分如下：牛肉膏0.3g、蛋白胨1g、氯化钠0.5g、琼脂2g、蒸馏水定容至100ml、pH7.0～7.2；

所述步骤b中的玉米粉液体培养基每百毫升组分如下：玉米粉1.5g，豆粕粉0.9g，磷酸氢二钠0.4g，磷酸二氢钾0.03g，MgSO₄0.1%，蒸馏水定容至100ml，pH6.8～7.0；

所述步骤c中的玉米粉发酵培养基，组分如下，均为重量百分比：玉米粉2.00%，豆粕粉7.00%，磷酸氢二钠0.40%，磷酸二氢钾0.03%，MgSO₄0.1%，消泡剂0.02～0.005%，pH6.8～7.0。