[发明专利]一种具有抗氧化作用的鹰嘴豆短肽的制备方法

权利要求书

1.一种具有抗氧化作用的鹰嘴豆肽，其特征在于，所述鹰嘴豆肽的序列为SEQ ID NO:1。

2.根据权利要求1所述的鹰嘴豆肽，其特征在于，所述鹰嘴豆肽可以是对SEQ ID NO：1的鹰嘴豆肽进行一个或多个氨基酸残基的缺失、增加和/或取代而获得的，其序列为SEQ ID NO：2-9。

3.根据权利要求1或2所述的鹰嘴豆肽，其特征在于，所述鹰嘴豆肽是药学上可接受的盐形式。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的鹰嘴豆肽，其特征在于，所述鹰嘴豆肽被乙酰化、PEG化或酰胺化修饰。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的鹰嘴豆肽的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）脱脂；

（2）蛋白酶水解；

（3）凝胶层析分离，获得所述鹰嘴豆肽。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

（1）将鹰嘴豆浸泡后脱皮，50℃烘干，用粉碎机打成豆粉。200目过筛，按豆粉:石油醚为1:10～1:12（w/v），优选地1:10～1:11（w/v），更优选地1:10.5的比例进行脱脂，室温下连续搅拌1h，鹰嘴豆自然沉降与石油醚分离，倾出石油醚进行回收，重复上述提取工艺两次，然后将鹰嘴豆粉置于通风橱下过夜，使石油醚充分挥发干净，将处理好的脱脂豆粉袋装置-20℃冰箱保存；

（2）脱脂豆粉与水按1:9～1:12（w/v），优选地1:10～1:11（w/v），更优选地1:10.5混合比例混合，搅拌均匀，用0.5mol/LNaOH调pH至8.3搅拌1h，3000r/min离心10～20min，沉淀按固液比1:5（w/v）提取两次，将三次上清液合并，上清液用0.5mol/L的HCl调至等电点pH4.3沉淀蛋白，10000r/min离心20min，冷冻干燥后，得到鹰嘴豆蛋白；

（3）将所述鹰嘴豆蛋白溶解于蒸馏水中制成质量溶度为2%-5%，优选地3%-4%，更优选地3.5%的蛋白水溶液，按碱性蛋白酶Alcalase与鹰嘴豆蛋白的比例为2%-5%，优选地3%-4%（v/w），更优选地3.5%，将Alcalase酶加入鹰嘴豆蛋白水溶液中，在pH8.0～pH9.0，优选地pH8.2～pH8.8，更优选地pH8.5，反应温度为40℃-60℃，优选地45℃-55℃，更优选地55℃的条件下，水解30-60min，将酶解液放入沸水浴中10min，再迅速放入冰水浴中10min，冷却后10000r/min离心10min,将离心出的液体部分冷冻干燥，得到鹰嘴豆肽粉末；

（4）将处理好的Sephadex G-25装成1.6×150cm的玻璃层析柱，用超纯水将鹰嘴豆酶解物配制成20mg/mL的溶液，上样量为5mL，用超纯水以20mL/h的流速洗脱，同时用紫外检测仪在280nm处检测，分时段共出现6个洗脱峰，收集第一个洗脱峰Ⅰ，冷冻干燥，获得所述鹰嘴豆肽。

7.一种组合物，其特征在于，包含根据权利要求1至4中任一项所述的鹰嘴豆肽。

8.根据权利要求7所述的组合物，所述组合物是药物组合物、保健品、食品添加剂、化妆品或饲料。

9.根据权利要求7或8所述的组合物，所述组合物为胶囊、片剂、口服液或冲剂。

10.根据权利要求1至4中任一项所述的鹰嘴豆肽在药物组合物、保健品、食品添加剂、化妆品或饲料制备中的应用。