[发明专利]一种抗菌肽混合液及其用于食品保鲜的方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物资源利用技术领域，具体涉及一种抗菌肽混合液及其用于食品保鲜的方法。

背景技术

豆腐由于含有蛋白质、脂肪、糖类和水分等成分，极利于微生物的生长。但高温杀菌、微波辐射等物理保质方法容易造成豆腐质构变化和口感下降，化学防腐剂又会对人体健康和生态环境产生不利的影响。因此有必要研究具有良好抑菌作用的天然生物保鲜物质来延长食品保质期。已有的研究证明天然色素、大蒜素、竹叶提取液以及中草药等天然植物体提取物对豆腐都有一定的防腐保鲜作用。但目前使用的大部分天然植物体提取物都是粗制品，其有效成份含量常随季节和地理环境而改变，且具体作用成分还不甚清楚，难以分离出纯品进行毒理学评价。另外，各种防腐剂的作用机理、抗菌谱和应用范围等研究的也不够深刻。因此有必要开发更高效更安全的生物防腐剂。

乳酸菌自古以来就广泛使用于食品的防腐保鲜，乳酸菌分泌产生的小分子肽类物质可被人体分泌的酶降解，其安全性显示了在食品保鲜中的应用价值。乳酸乳球菌乳酸亚种产生的细菌素Nisin是FAO批准的唯一可用于食品保鲜的细菌素，它可以抑制或杀死一些革兰氏阳性的病原菌和食物腐败菌，且具有高效、无毒、无残留、无抗药性等优点，广泛应用于牛奶、奶酪、罐装食品、鱼肉制品、啤酒、饮料等的防腐保鲜。由于Nisin只能在酸性条件下呈可溶性状态，在中性条件下溶解性低，稳定性差，极大地影响了Nisin在豆制品保鲜中的应用。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种可用于食品保鲜的抗菌肽混合液。

为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种抗菌肽混合液，本抗菌肽混合液由两种菌株制备的抗菌肽混合而成，其中：

一种乳酸乳球菌乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp.lactis）LLC518，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为：CGMCCNo.4584；

一种清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）LSJ618，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为：CGMCC No.7017；

通过发酵所述乳酸乳球菌乳酸亚种乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp.lactis）LLC518而得到的抗菌肽，命名为Lacticin LLC518；通过发酵所述清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）LSJ618而得到的抗菌肽，命名为Sakacin LSJ618；

将抗菌肽Lacticin LLC518和Sakacin LSJ618以质量比为1:1的比例混合得到混合物，再将得到的所述混合物和水以质量比为1:10的比例相混合即可得到本抗菌肽混合液。

抗菌肽的制备方法通过以下途径：

首先从MRS固体斜面培养基上挑取已活化的乳酸乳球菌乳酸亚种乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp.lactis）LLC518和清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）LSJ618，并分别接种于MRS液体种子培养基中，37℃摇床培养12小时，再按4%的接种量分别接种于MRS发酵培养基中，37℃静置培养24h，即可得到乳酸乳球菌乳酸亚种乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp.lactis）LLC518发酵液和清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）LSJ618发酵液：将两种发酵液分别经陶瓷膜过滤除菌后，再喷雾干燥即可分别得到粉末状的Lacticin LLC518成品和Sakacin LSJ618成品。

喷雾干燥步骤的具体条件如下：将乳酸乳球菌乳酸亚种乳酸亚种（Lactococcus lactis subsp.lactis）LLC518发酵液和清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）LSJ618发酵液分别在温度25℃的条件下，通过操作压力为0.02Mpa，膜孔径为0.2μm的陶瓷膜过滤后得到去除菌体的上清液，分别向两种上清液中加入固体食盐，所加入的固体食盐的质量占所述上清液体积的比例为1:10，待固体食盐完全溶解后通过喷雾干燥机进行喷雾干燥，所述喷雾干燥机的进风温度为150℃，出风温度为130℃，喷雾干燥后即得到粉末状的Lacticin LLC518成品和Sakacin LSJ618成品。