[发明专利]一种脾脏铁蛋白提取纯化的方法

权利要求书

1.一种脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于将动物脾脏绞碎，溶剂提取，热变除杂，氯化镁或氯化钙盐除杂，提取液浓缩，粗品沉淀，粗品结晶。

2.根据权利要求1所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于该方法具体包括以下按步骤：

1）将动物脾脏粉碎成匀浆；

2）将所述的匀浆与水混合，并再粉碎以便于铁蛋白的溶出；

3）将步骤2）中再粉碎后的匀浆加热至60℃~85℃，立即降温至25℃以下；

4）将步骤3）所得匀浆加入CaCl₂或MgCl₂除杂得提取液；

5）将步骤4）所得提取液离心后取上清液超滤浓缩后得浓缩液；

6）将步骤5）所得浓缩液中加丙酮进行分级沉淀铁蛋白得粗品铁蛋白，或者加硫酸铵沉淀铁蛋白得粗品铁蛋白；

7）将步骤6）所得的粗品铁蛋白用水或/和硫酸铵溶液溶解得粗品铁蛋白溶解液并用硫酸镉结晶，得精品铁蛋白。

3.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤1）中将动物脾脏绞碎后用胶体磨粉碎至粒度2~50μm的匀浆。

4.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤2）中将所述的匀浆与水混合并用胶体磨再粉碎1~2遍。

5.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤4）中氯化镁或氯化钙的添加量为匀浆的1%~5%。

6.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤5）中所述的上清液经超滤浓缩至原体积的1/2~1/6。

7.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤6）浓缩液中加丙酮进行分级沉淀，分级沉淀的过程为：（1）初沉：向浓缩液中加入丙酮得初沉溶液，静置，离心留上清液；（2）复沉：向上清液中加丙酮得复沉溶液，离心得粗品铁蛋白。

8.根据权利要求7所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于初沉时所述初沉溶液中丙酮的体积百分浓度为5%~18%，复沉时所述复沉溶液中丙酮的体积百分浓度为52%~69%。

9.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤6）浓缩液中加硫酸铵沉淀铁蛋白时，硫酸铵的添加量为浓缩液的30%~40%，优选为35%。

10.根据权利要求2所述的脾脏铁蛋白提取纯化的方法，其特征在于步骤7）中用来溶解粗品铁蛋白的硫酸铵溶液的质量百分浓度为0.5~1.5%，优选为1%，硫酸镉的添加量为粗品铁蛋白溶解液的2%~10%，优选为5%。