[发明专利]一株章鱼肠道内产蛋白酶菌株及其蛋白酶的应用

说明书

技术领域

本发明涉及的是一株章鱼肠道内产蛋白酶菌株及其蛋白酶的应用。

背景技术

我国水域辽阔，鱼类资源十分丰富，水产品加工的过程中，必然会产生大量的下脚料，这些废弃物中含有丰富的蛋白质、磷脂质、软骨素、维生素等。如果不进行有效的处理,不仅会造成环境的污染,而且浪费了宝贵的蛋白质资源。目前,这些废弃物的利用仅限于加工成鱼粉、饲料等低值制品,未能充分利用蛋白质资源。随着现代生物工程技术的高速发展,酶工程技术在食品工业中的应用也越来越广泛。

国内外常用的蛋白酶主要是植物来源的蛋白酶（木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等），动物来源的蛋白酶（胃蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶等）和微生物产生的碱性蛋白酶。但是应用于下脚料的酶解中的研究报道甚少。国内有酶法水解烤鳗和罗非鱼下脚料中的报道^[1-2]。国外也已经有报道对小沙丁鱼和乌贼等下脚料的酶解报道，并指出酶解产物的生物活性，如抗氧化火性、抗菌活性、乳化作用等^[3-5]。

本发明以章鱼为供试材料进行肠道产蛋白酶菌株的分离，其属软体动物门（Mollusca）、头足纲（Cephalopoda）、八腕目（Octopoda）、章鱼科（Octopodidae）、章鱼属（Octopus）^[6]。广泛分布于我国南、北沿岸海域。我国常见的种类有饭蛸（短蛸，O.ocellatus），长腕蛸（长蛸，O.variabilis）和真蛸(O.vulgaris)等。章鱼对温度的适应范围广泛，属于喜盐动物，其食性广泛，以肉食为主，尤其喜食蟹类、海蛞蝓和贝类，不同种之间存在着一定差异^[7]。

鱼类肠道菌群是机体生长发育等生命活动的影响因素之一^[8-9]。研究表明，肠道菌群是在与宿主共同进化过程中形成的正常组成部分，并且与消化、营养以及急慢性感染等有关^[10-12]。近年来，国内外学者对鱼类病原细菌分离鉴定研究较多，而对于鱼类肠道细菌报道不太多，特别是章鱼肠道细菌的分离鉴定研究，目前尚未见文献报道。而且肠道细菌的研究主要是分离鉴定和产酶能力方面，针对下脚料上的应用未见报道。

国内对鱼类肠道中产蛋白酶细菌的研究报道主要是菌株的分离。许禔森从健康鲈鱼肠道中共筛选出18株产蛋白酶的益生菌，其中4株的产酶活力特别强^[13]。王富强等从牙鲆鱼肠道内分离25株产蛋白酶菌株，其中Y2-2菌株对牙鲆幼鱼生长有促进作用^[14-15]。冯新忠等从额尔齐斯河野生丁(鐬)中分离40株产蛋白酶的菌株,其中8株蛋白水解圈较大^[16]。另外国内还有军曹鱼、九孔鲍、牡蛎、黄鳝、草鱼、银鲫鱼等肠道中也分离了产蛋白酶菌株^[17-^21]。

国外对内脏蛋白酶的研究比较多，但专门研究内生菌产的蛋白酶的研究并不多。Sudeepa从海产内脏中分离得到了蛋白酶产生菌^[22]，Bhaskar进一步利用这种菌发酵产生碱性蛋白酶^[23]；Izvekova也研究了淡水鳕肠道中的共生微生物会产生蛋白酶，并可以帮助寄主消化^[24]。Esakkiraj等鲻鱼肠道中分离了产蛋白酶活性的蜡状芽孢杆菌，该菌产生的蛋白酶的最佳pH为7.0，最佳温度为60℃，为下脚料的精加工及去污剂工业上的应用可能性提供了科学依据^[25]。Izvekova等从梭子鱼中分离蛋白酶活性的5株菌株^[26]。

参考文献

[1]黄志勇,赖海涛,许伟雄,等.酶法提取烤鳗下脚料中水解动物蛋白的研究.食品科学,2002,23(10):76-78.

[2]任增超,周春霞,洪鹏志,等.酶法水解对罗非鱼下脚料蛋白功能特性的影响.现代食品科技,2008,24(12):1213-1216.

[3]Nabil S,Ali B,Yousra T E et al.Biochemical and functional properties of sardinella (Sardinella aurita)by-product hydrolysates.Food Technology and Biotechnology,45(2):187-194.